棉花黄萎病抗性评价关键技术及分子检测方法研究

来源 :中国农业科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuxuchen0822
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棉花黄萎病作为土传性维管束病害,严重制约着棉花生产。其发病时间长,化学防治和生物防治难度大,种植抗病品种是最经济有效的措施。无论是抗病育种材料的筛选还是棉花品种审定,准确评价品种的黄萎病抗性是技术核心。棉花黄萎病对棉株的影响是全方位、多因素的,要综合各项指标联合评定。本研究以2014年农业部主推的14个棉花品种为试验材料,系统研究了黄萎病抗病鉴定关键技术,确定了病圃的标准接菌量,建立了与产量相关的分级标准等。以不同抗病性的28个棉花品种为研究对象,初步探索了基于qPCR抗病性的快速检测方法。主要结果如下:1.在人工病圃内进行小区试验,通过设置浓度梯度,用实际病情指数衡量感病品种冀棉11在不同接菌浓度下的发病程度,来确定不同接种方法的最佳接菌量。根据发病均匀度和病情指数的可信度得知,小区接种和行沟接种的最佳接菌量分别为60 g/㎡和10 g/m。2.以中植棉2号,鲁棉研28,中棉所50,中棉所49和中棉所63为试验材料,以10株为单位,分别与100株的大群体的病情指数进行分析比较。结果显示,当调查株数大于等于50株时,偏离率均小于5%,属于较为可信的范畴。因此50株为最小调查株数。3.通过分析耐病品种鲁棉研28和中棉所63的产量和发病级别的关系,初步制定了新的病情分级标准,按照植株发病面积分为五级:0级(0%)、1级(1%-33%)、2级(34%-66%),3级(67%-99%)和4级(100%),两个品种均表现随着病情级别的增加产量逐渐降低,且不同级别的病株之间差异达到显著水平,1、2、3和4级病株分别比健康植株(0级)减产20.9%、34.4%、50.1%和71.6%,病级间产量差异显著。4.2014年农业部主推的14个棉花品种为试验材料,以中植棉2号和冀棉11为抗、感对照,根据2014年和2015年两年数据来比较相对病情指数和相对AUDPC对棉花品种抗病性的判定差异。利用多次调查获得相对AUDPC对不同品种的抗性评价一致性(100%)明显高于发病高峰期获得的相对病指(75%),结果更为稳定可靠。5.通过分析不同生育期的鲁棉研21和中棉所63黄萎病发生严重度对纤维品质的影响,结果显示随着发病级别的增加,纤维长度和马克隆值显著降低,黄萎病对比强度、伸长率和整齐度的影响在不同年份和不同品种之间有差异;6.基于荧光定量PCR技术,并结合重病田的发病情况,以不同抗病性的28个棉花品种为研究对象,探讨棉苗根部病菌定殖量和抗性之间的关系,确定接菌后1天为最佳取样时间,定殖病菌DNA含量和品种病情指数呈现出明显相关性。初步确定品种根部病菌DNA浓度在0~1 pg ng-1之间为抗性品种,1~2 pg ng-1之间的是耐病品种,大于2 pg ng-1的为感病品种。综上所述,该研究的结果表明正确把握病圃菌量、建立和产量相关的病害分级标准、保证科学可靠的样本量、选择稳定性高的评价方法是对棉花品种黄萎病抗性真实反映的基础,也是规范棉花抗性评价方法的关键所在。本试验为完善制定抗病鉴定技术操作规程,规范抗性评价方法,促进棉花抗病品种的选育、审定和推广提供了科学依据。
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