玻璃体腔内注射曲安奈德治疗兔视网膜水肿的实验研究

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目的:研究常规剂量国产曲安奈德(TA)玻璃体腔内注射对兔视网膜组织结构和功能的影响,探讨其玻璃体腔内注射治疗视网膜水肿的作用机制,为曲安奈德的临床应用提供理论依据。方法:第一部分纯种健康新西兰大白兔48只,随机分为2组行玻璃体腔内注射,第1组动物右眼注射生理盐水0.1ml作为对照A组,左眼注射TA混悬液4mg/0.1ml作为试验B组,第二组动物右眼注射去赋形剂的TA 0.1ml(去除的赋形剂用生理盐水补足)作为试验C组,左眼注射从曲安奈德混悬液中分离的赋形剂0.1ml作为试验D组。每只动物于注药前及注药后3天、2周及1月各时间点行双眼FERG检查,注药后各时间点每组检查后随机处死8只动物,取出眼球行视网膜光学及电子显微镜检查,观察其结构的改变。第二部分选用健康新西兰大白兔30只,随机选取6只不作任何处理作为正常组,其余24只用氩激光封闭视网膜静脉诱导视网膜水肿模型,建模后每只动物右眼注射TA混悬液4mg/0.1ml作为治疗组,左眼不作任何处理作为对照组。于注药后3天、1周、2周及1月各时间点随机处死6只动物,光镜下观察视网膜组织结构的变化,原位杂交法检测视网膜组织中VEGF mRNA的表达,免疫组化法检测视网膜组织中IL-6的表达,应用图像分析系统Image Pro Plus 6.0对结果进行定量分析。结果:第一部分各实验组兔眼注药前后FERG b波潜伏期无明显变化,在注药后短时间内有b波振幅的降低,差异具有统计学意义(p<0.01);赋形剂组在注药后1月仍有b波振幅的降低,差异具有统计学意义(p<0.01),其余各组在1月时b波振幅已基本恢复正常。光学及电子显微镜观察,赋形剂组在注药后各时间点均有视网膜结构的改变,去赋形剂组以及TA混悬液组只在短时间内有视网膜结构的改变。第二部分48只眼成功建立兔视网膜水肿模型,光镜下曲安奈德治疗组视网膜组织水肿程度低于对照组,建模后VEGF在对照组视网膜组织各时间点均有高表达,IL-6仅在建模早期有较强表达,曲安奈德治疗组视网膜组织中VEGF mRNA以及IL-6的表达明显低于对照组,差异有显著性(p<0.05)。结论:4mg国产TA混悬液兔眼玻璃体腔注射短期内可引起视网膜结构和功能的轻度改变,但这种改变只是暂时性和可逆的,其对视网膜的毒性可能主要是由赋形剂引起的。在视网膜静脉阻塞后视网膜水肿的发生过程中VEGF扮演了重要角色,IL-6与VEGF有着类似的作用,曲安奈德能够有效降低视网膜水肿后VEGF及IL-6在视网膜组织中的表达,减轻视网膜水肿,保护视网膜。
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