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已有研究发现环氧合酶-2(cyclooxygenase,COX-2)在多种恶性肿瘤中高表达,包括结肠癌、胃癌、食道癌、肝细胞癌、卵巢癌、乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌等。COX-2对肿瘤的生成和发展起着促进作用。目前国内外有较多的研究发现抑制COX-2可以在多个方面抑制肿瘤的发展。但是COX-2表达与药物治疗的关系仍未能得到明确的答案。本课题利用子宫内膜癌RL95-2和Ishikawa细胞株,观察COX-2抑制剂Celecoxib对不同细胞株的作用效果,研究COX-2抑制剂对不同子宫内膜癌细胞株COX-2及抑癌基因p53的调控作用,验证其作为肿瘤治疗药物或辅助化疗药物的可行性,希望为子宫内膜癌的治疗提供新的理论基础。一.COX-2抑制剂Celecoxib对子宫内膜癌细胞株RL95-2和Ishikawa增殖和凋亡的影响目的:了解Celecoxib对子宫内膜癌细胞株RL95-2和Ishikawa增殖和凋亡的影响。方法:培养瓶培养子宫内膜癌细胞株RL95-2和Ishikawa细胞,分为对照组(培液),Celecoxib组。应用MTT检测Celecoxib对RL95-2和Ishikawa细胞生长抑制作用,其中Celecioxb浓度取12.5umol/L,25umol/L,50umol/L,100umol/L,200umol/L。分别观察24h,36h,48h。培养瓶培养子宫内膜癌细胞株RL95-2和Ishikawa细胞,分为对照组(培液),Celecoxib组(100umol/L),采用流式细胞仪检测RL95-2和Ishikawa细胞经作用24hr后凋亡情况。结果:Celecoxib能抑制子宫内膜癌株RL95-2和Ishikawa细胞生长,其抑制作用与剂量相关。在浓度为100umol/L与200umol/L时,与其他浓度相比,增殖抑制有统计学差异(P＜0.05)。在200umol/L时,药物对RL95-2细胞的增殖抑制与Ishikawa细胞相比有统计学意义(P＜0.05)。研究发现,RL95-2细胞株中,对照组早期凋亡率为0.54%,Celecoxib组早期凋亡率为4.75%。对照组晚期凋亡率为1.40%,Celecoxib组晚期凋亡率为10.4%。Ishikawa细胞株中,对照组早期凋亡率为2.66%,Celecoxib组早期凋亡率为3.25%。对照组晚期凋亡率为6.25%,Celecoxib组晚期凋亡率为7.85%。RL95-2细胞系的早期凋亡率和晚期凋亡率都较Ishikawa细胞系变化更显著。二.COX-2抑制剂Celecoxib对子宫内膜癌细胞株RL95-2和Ishikawa p53及COX-2 mRNA转录的影响和COX-2蛋白表达的影响目的:了解Celecoxib对RL95-2和Ishikawa细胞株p53及COX-2 mRNA表达的影响和COX-2蛋白表达的影响。方法:培养瓶培养细胞,分为对照组(培液),Celecoxib组(100mmol/L)。采用RT-PCR检测两细胞株经作用24hr后p53及COX-2 mRNA表达的情况,采用Western Blot检测两细胞株经作用24hr后COX-2表达的情况。结果:在RL95-2细胞株中,经Celecoxib作用后,p53 mRNA转录量增加,COX-2 mRNA转录量减少。在Ishikawa细胞株中,经Celecoxib作用后,p53 mRNA转录量减少,COX-2 mRNA转录量未有明显变化。在RL95-2细胞株中,经Celecoxib作用后,COX-2蛋白表达量减少。在Ishikawa细胞株中,经Celecoxib作用后,COX-2蛋白表达量未有明显变化。结论:Celecoxib可抑制子宫内膜癌细胞株RL95-2和Ishikawa的增殖及促进其凋亡,在RL95-2细胞株中作用更为明显。在RL95-2中,Celecoxib可下调COX-2及上调p53,在Ishikawa中,Celecoxib下调p53且对COX-2的表达无明显抑制作用。COX-2抑制剂可通过COX-2途径和非COX-2途径影响肿瘤细胞的增殖和凋亡,为子宫内膜癌的治疗提供了新方法。