本实验以性别鉴定为研究内容，旨在建立性别鉴定程序，提高性别鉴定的准确率，使性别鉴定技术达到使用化的应用阶段，实现性别控制。实验以反刍动物中的凉山半细毛羊(20个体)、新疆细毛羊(4个体)、山羊(5个体)、牛(6个体)为研究对象，应用多重PCR技术扩增绵羊基因组中X染色体上的微卫星标记MILVET09、AE25和Y染色体上的MCM158、MAF45及SRY基因，根据基因型进行性别鉴定，试图通过一次DNA扩增同时提供性别鉴定和基因分型的信息。 实验结果表明：所设计SRY基因的引物具有高度特异性，是性别鉴定的主要依据，而Y染色体上的MCM158、MAF45两标记的引物由于特异性不好，因此不适用于性别鉴定，对于X染色体上所选的两个标记MILVET09和AE25的引物只能进一步验证所鉴定的雄性个体。结论：在所有的被检个体中，能同时扩增出Y染色体上的SRY、MCM158、MAF45，X染色体上MILVET09和AE25，且X染色体上的MILVET09、AE25基因型为纯合子的个体为正常的雄性，如果某些被检个体的MILVET09、AE25两标记基因型出现杂合子的现象，则说明这些被检个体为性染色体发育异常的雄性(XXY)，不能留作种用，本实验所用的雄性实验动物没有出现这种异常情况：被检个体中只有Y染色体上MCM158、MAF45和X染色体上MILVET09、AE25的扩增产物，而没有SRY基因的扩增产物，则被检个体为雌性，且MILVET09、AE25的基因型对雌性个体的性别判断无影响。MCM158、MAF45两标记基因型不影响个体的性别鉴定结果。 过去扩增的X-Y特异性片段多为缺乏多态性的片段，不能提供其他个体差异的信息。该实验选择SRY基因以及X染色体和Y染色体的多个多态位点进行复合扩增可以说是一种有意义的尝试，利用该项研究建立的方法既可进行性别鉴定，又可用来同一认定，与传统的性别检查有着本质的区别，这在今后的体育竞赛、金融保险等领域具有广阔的应用前景。另外，该方法还可用于动物肉食制品的监测、性别分化和性发育异常、疾病筛选、法医学、考古学以及各类刑事案件串、并案的侦破等领域。