【摘 要】
：
猪圆环病毒 2 型（Porcine circovirus type 2,PCV2）是圆环病毒科（Circoviridae）的一员,在形态结构上为20面体对称,无包膜,直径在17～20 nm,是猪圆环病毒病（Porcine circovirus associated diease,PCVAD）的主要致病因素。该病分布广泛,呈世界性流行,给世界各大养猪国带来了极大的损失。PCV2开放阅读框2（Open
论文部分内容阅读
猪圆环病毒 2 型（Porcine circovirus type 2,PCV2）是圆环病毒科（Circoviridae）的一员,在形态结构上为20面体对称,无包膜,直径在17～20 nm,是猪圆环病毒病（Porcine circovirus associated diease,PCVAD）的主要致病因素。该病分布广泛,呈世界性流行,给世界各大养猪国带来了极大的损失。PCV2开放阅读框2（Open reading frame,ORF2）编码病毒衣壳（Cap）免疫原性蛋白,在体外可自发组装成病毒样颗粒（Virus-like particles,VLPs）。但由于ORF2序列N端的核定位信号区富含有连续的稀有密码子,并且原核表达系统中缺少相关的稀有密码子,使得在大肠杆菌中表达Cap蛋白是困难的。因此本研究为克服Cap蛋白在大肠杆菌表达困难的问题,做了以下工作:（1）通过PCR的方法,扩增出PCV2 ORF2序列,构建重组质粒pET32a-nCap,并转入大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）和Rosetta gamiB（DE3）中,定义为策略0和策略2。经鉴定,在策略2中成功表达,可溶性重组蛋白大小在47 kDa左右,具有特异性,经改良的镍亲和层析法纯化,在透射电镜下可观察到VLPs,命名为VLP-B。（2）通过密码子适配工具,将ORF2序列进行密码子优化,合成重组质粒pET32a-yCap,并转入上述感受态细胞中,定义为策略1和策略3。经鉴定,均能表达大小在47 kDa左右的可溶性重组蛋白,均具有特异性,在透射电镜下可观察到VLPs,分别命名为VLP-A和VLP-C。（3）为了评价不同策略,将3种VLPs与弗氏佐剂乳化后制备成疫苗并在小鼠体内进行了免疫原性评价。结果显示,三种疫苗在接种后7天（Days post inoculation,dpi）抗体水平迅速升高,14 dpi时均已达到阳性,在28 dpi达到最高峰,并维持在一个较高的水平直至42 dpi,同时也诱导产生了 Th1/Th2型细胞反应,其中VLP-C与VLP-B效果较好,VLP-A次之,均强于灭活疫苗组。（4）综上所述,本研究所制备的VLPs能诱导良好的抗体和细胞因子反应,其中策略2和策略3优于策略1,为制备亚单位疫苗及相关生物制品奠定了基础。
其他文献
代森锰锌（Mancozeb,MCZ）是一种乙烯双二硫代氨基甲酸酯类广谱杀菌剂,主要用于保护各种蔬菜、水果和其他农田作物免受真菌病害。研究表明,长期暴露MCZ会危害人类和动物健康,尤其在妊娠期暴露MCZ可通过血胎盘屏障损害下一代的生长发育。甘草多糖（Glycyrrhizapolysaccharide,GP）是传统中药甘草的主要活性成分之一,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节和保护肝脏等药理作用。本研
全氟辛酸（Perfluorooctanoic acid,PFOA）是一种具有良好的热稳定性、化学稳定性等特殊性质的物质,被广泛应用于生活中常见的物质中。但PFOA在环境中很难被降解,这给人类及动物带来了巨大威胁。近年来,PFOA对人和动物的生殖系统的影响被引起高度重视。枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharide,LBP）是枸杞的主要活性成分之一。本研究在妊娠期暴露3.5
奶牛子宫内膜炎主要是由细菌感染引起的奶牛常见疾病,目前多采用抗生素治疗,但由于抗药性以及休药期等问题所造成的损失也愈发严重,严重影响奶牛养殖的经济效益。因此急需开发一种绿色高效的治疗手段。鼠李糖乳杆菌GR-1（Lactobacillus rhamnosus GR-1,L.rhamnosus GR-1）是益生菌家族的一员,具有拮抗致病菌、调节固有免疫和分泌益生物质等特性,有望成为用于防治奶牛子宫内膜
由鸭圆环病毒（Duck circovirus,DuCV）和禽流感病毒（Infectious laryngotracheitis virus,AIV）引起的鸭圆环病毒病（Duck circovirus disease,DuCVD）及禽流感（Avian influenza,AI）因其容易传播、难以防控和临床危害大的特点,对养殖户造成严重的经济损失。误诊和迟诊加剧了疫病带来的危害,因此,先进的检测技术对
奶牛养殖上经常会发生各种类型的乳腺炎,奶牛乳腺炎在全球范围内都属于易发疾病,乳腺炎的发生首先在生产上影响了奶牛乳产品的质量,其次又在治疗和预防方面增加了成本,还降低了奶牛养殖的最终经济效益。现代研究表明,奶牛乳腺炎的发生是多种因素引起的,环境卫生脏乱差、饲料种类营养不全或过盛、挤奶方式不善和多种病原菌侵袭都有几率引起奶牛乳腺炎的发生,从动物福利角度看,奶牛情绪也会影响自身乳腺组织的健康。在众多研究
＜正＞一、"黄帝文化"是华夏文化、中华民族文化的"根文化"从历史学与考古学两个方面研究中国古代文明起源与形成的时间、空间的一致性,从而可以说明黄帝文化是华夏文化、中华民族文化的"根文化"。从已知探寻未知,由近及远,从唐宋元明清上溯至秦汉,从秦汉再上溯至夏商周,又上溯至中原龙山文化（王湾三期）、仰韶文化（庙底沟文化）、裴李岗文化,乃至旧石器时代文化,可以佐证黄帝文化是一脉相承的发展谱系。黄帝文化
本试验利用转录组学联合蛋白质组学的方法,研究氟苯尼考（FFC）造成肉鸡肾损伤过程中转录水平及蛋白水平的变化,以及丹参多糖（SMPs）缓解FFC造成肉鸡肾损伤的分子机制。将240只1日龄肉鸡随机平均分成6组:KA组饲喂正常的自来水,KB组在饮水中加0.15 g/LFFC,KC、KD、KE组在饮水中均加入0.15 g/LFFC的基础上再分别加 5.00 g/L、2.50 g/L、1.25 g/L 的
棉花是全球重要的经济作物,为世界工业提供天然纤维和生物燃料。黄萎病是由土传真菌大丽轮枝菌引起的维管束病害,对棉花产量和品质造成重大影响。在植物中,茉莉酸在响应病原体和食草动物的攻击时大量合成,从而导致防御反应的激活。茉莉酸的持续积累会抑制植物生长,因此茉莉酸诱导的氧化酶（JASMONATE-INDUCED OXYGENASEs,JOXs,又茉莉酸氧化酶）通过将茉莉酸羟基化为12-羟基茉莉酸来平衡植
日常列车巡检工作是保障城市轨道交通安全运营的重要环节。人工巡检方式通常受到巡检人员自身多种因素的影响，巡检效率较低。随着城市轨道交通网络化发展，车辆数量不断增加，需要实现列车巡检工作的智能化。运用智能机器人自动巡检方式取代人工巡检已成为新的发展趋势，这也是智能运维发展的必然趋势。介绍了智能巡检机器人的网络体系结构和系统框架，定位导航技术、部件识别模块、故障判定模块等关键技术，以及在上海轨道交通蒲汇
子宫内膜炎是奶牛产后普遍发生的一种疾病,不仅影响着奶牛的繁殖效益和产奶量,甚至还会威胁奶牛的生命,对奶牛养殖业造成巨大的经济损失。本试验在对河北省奶牛子宫内膜炎进行流行病学调查的基础上,分离其致病菌大肠杆菌,通过对其进行血清型鉴定、多位点序列分析、致病性试验、毒力基因检测、药敏试验、耐药基因及可移动元件检测,以便为奶牛子宫内膜炎的治疗提供依据。对该病的流行情况调查发现,奶牛子宫内膜炎在河北省的总发