中国南方红树林内生拟盘多毛孢资源及多样性研究

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内生拟盘多毛孢是木本植物内生真菌的重要类群。分离自红豆杉的内生小孢拟盘多毛孢( Pestalotiopsis microspora)能产生抗癌的代谢产物紫杉醇,因而引起了人们对内生拟盘多毛孢研究的兴趣。本研究是国家自然科学基金项目“红树林内生拟盘多毛孢资源、多样性及分类学研究(30700002)”的一部分。作者通过对采自广东、广西的红树林植物材料进行广泛的分离,研究两广地区红树林内生拟盘多毛孢在物种、生态和遗传方面的多样性,通过对分离获得的拟盘多毛孢进行部分性状稳定性研究,探讨几个形态指标在各菌株间及各代之间稳定性及分类学意义,同时选取代表菌株的ITS序列、beta-tubulin基因进行序列测定,通过分析多个基因片段形成的系统发育树并结合形态学的方法探讨拟盘多毛孢属的分类模式。主要研究结果概括如下:1.两广地区红树林植物内生拟盘多毛孢的种类鉴定2009年作者选取广东特呈岛和广西山口红树林自然保护区的重要红树林植物,进行内生拟盘多毛孢资源的调查,从19种红树林植物中分离纯化出753株内生真菌,其中76株为内生拟盘多毛孢,鉴定为22个种。2.广东、广西和海南红树林植物内生拟盘多毛孢的多样性内生拟盘多毛孢的定殖率因采样点的不同而不同,如:秋茄内生拟盘多毛孢的定殖率以广东特呈岛最高,显著高于其他两地区;红海榄内生拟盘多毛孢的定殖率以海南最高;而木榄内生拟盘多毛孢的定殖率三地区无显著性差异;海南地区的海漆内生拟盘多毛孢的定殖率为1.1%,而广东和广西地区均未在海漆中分离到内生拟盘多毛孢。内生拟盘多毛孢的定殖率因红树林植物种类的不同而不同,如:海南秋茄和海桑内生拟盘多毛孢的定殖率最高,达到8.9%,而白骨壤内生拟盘多毛孢的定殖率却为0%。广东秋茄内生拟盘多毛孢的定殖率(20.0%)明显大于其他几种红树林植物中内生拟盘多毛孢的定殖率,差异达极显著水平。内生拟盘多毛孢的物种组成与采集点及植物种类有密切关系,如:海南东寨港10种红树林植物分离到的内生拟盘多毛孢为27种,广东特呈岛4种红树林植物分离到的内生拟盘多毛孢为12种,广西山口7种红树林植物分离到的内生拟盘多毛孢为18种。广西山口红树林植物中秋茄分离到的内生拟盘多毛孢种类达10种,而木榄只分离到3种,白骨壤只分离到1种分析广东、广西、海南红树林植物内生拟盘多毛孢的多样性指数发现,内生拟盘多毛孢的物种多样性指数与该植物的内生拟盘多毛孢的均匀度指数无关,而与丰富度指数成正相关。3.拟盘多毛孢的分类学性状研究拟盘多毛孢分生孢子的长度、宽度以及顶端附属丝的长度的变化在3个世代间是相对稳定的,差异不显著。不同发育天数的拟盘多毛孢分生孢子的长度、宽度以及顶端附属丝长度的变化较小,而随发育天数的增加,分生孢子的色孢颜色不断加深并在6-8天达到稳定,色孢稳定的成熟孢子数也随时间推移而增加。4.拟盘多毛孢属分子系统学研究对76个菌株(含29个种)的ITS和β-tubulin拼接后的序列建立分子系统树,结果表明,76个菌株首先以中间色胞颜色分成两大类群X组(棕褐色-浅褐色/橄榄色”或“煤烟色-浅褐色/橄榄色)和Y组(褐色-橄榄色),X组又分成两个亚分支(a和b),Y组也分成两个亚分支(c和d)。a分支顶端附属丝顶端不膨大,而b分支顶端附属丝顶端呈匙状膨大。d分支中分生孢子的长度差异较大,c分支中分生孢子的宽度差异较大,这些形态存在差异的不同种类的拟盘多毛孢菌株却聚集在一起。这表明分生孢子长度、宽度及顶端附属丝长度在一定范围内不适宜作为拟盘多毛孢分种的依据。
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