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目的：阐明吡柔比星（pirarubicin，THP）对骨肉瘤多药耐药细胞系MG63/DOX细胞体外增殖抑制作用及其机制，为耐药骨肉瘤的治疗提供理论依据。
方法：CCK-8法检测阿霉素（doxorubicin,ADM）、THP、顺铂（cisplatin，DDP）、甲氨蝶呤（methotrexate，MTX）、吉西他滨（gemcitabin，GEM）对MG63、MG63/DOX细胞的增殖抑制作用。流式细胞仪PI染色法和AnnexinV/PI双染法分别检测细胞周期和凋亡。RT-PCR法检测肿瘤耐药相关基因和细胞周期相关基因mRNA。Western Blotting法检测细胞周期相关蛋白。液相色谱-串联质谱法（LC/MS/MS）测定细胞内药物浓度。
结果：MG63/DOX 细胞对ADM、GEM耐药，对THP、DDP、MTX敏感。THP对MG63/DOX细胞的抑制作用呈时间、浓度依赖性。THP与DDP联用能增强对MG63/DOX细胞体外增殖抑制作用。THP将MG63/DOX细胞周期阻滞在G2/M期，且呈时间、浓度依赖性，但对细胞凋亡无明显影响。THP可下调MG63/DOX细胞cyclin B1 mRNA、蛋白及p-Cdc2（Thr161）蛋白表达，上调p-Cdc2（Thr14/ Tyr15）、p-Cdc25C（Ser-216）蛋白表达，但对拓扑异构酶II（Topo Iiα、Topo Iiβ）、ABCB1（MDR1）、Cdc2mRNA 表达及Cdc2、Cdc25C蛋白表达无影响。1000ng/ml THP或ADM作用后，MG63细胞内药物浓度较MG63/DOX细胞显著升高，不同时间点差异均有统计学意义（p<0.01）；1000ng/mlTHP作用MG63/DOX细胞或MG63细胞后细胞内药物浓度均较同浓度ADM作用后高，不同时间点差异均有统计学意义（p<0.01）。
结论：（1）THP对MG63和MG63/DOX细胞均有生长抑制作用，与DDP联用能增强对细胞增殖的抑制作用。（2）THP将MG63/DOX细胞周期阻滞在G2/M期，其机制可能与cyclin B1下调以及Cdc2和Cdc25C蛋白磷酸化有关。（3）与ADM相比，THP较易进入MG63、MG63/DOX细胞内，这可能是THP体外抗瘤活性较ADM强的原因之一。