刺糖多糖的分离纯化和结构分析

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目的:分离纯化刺糖多糖,并对刺糖多糖的结构进行分析。方法:1.采用水提醇沉法提取刺糖粗多糖,Sevag法除蛋白,分级醇沉法对刺糖多糖进行初步分级,联合使用大孔吸附树脂、纤维素和葡聚糖凝胶柱色谱对刺糖多糖进行分离纯化。2.采用凝胶过滤法测定各刺糖多糖组分的纯度和分子量,气相色谱法测定各刺糖多糖组分的单糖组成。3.对含量较高的刺糖多糖组分进行部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解和核磁共振分析。结果:1.首次从刺糖中提取分离得到11个多糖组分。2.结构分析表明:多糖AP1-1分子量为9.97×104,由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比为1.81∶1.10∶2.19∶4.32;多糖AP1-2分子量为5.51×104,由阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比为1.66∶12.08∶2.92;多糖AP1-3分子量为4.75×104,由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比为2.11∶3.80∶4.19∶7.43;多糖AP1-4分子量为2.75×104,由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为8.91∶3.29∶5.60∶0.67∶3.76;多糖AP1-5分子量为1.85×104,由甘露糖组成;多糖AP1-6分子量为1.45×104,由甘露糖和葡萄糖组成,摩尔比为8.86∶7.21;多糖AP2-1分子量为8.40×103,由鼠李糖和阿拉伯糖组成,摩尔比为1.69∶17.20;多糖AP2-2分子量为5.12×103,由鼠李糖和甘露糖组成,摩尔比为1.43∶12.96;多糖AP2-3分子量为4.20×103,由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为10.61∶7.79∶2.54∶3.98∶1.16;多糖AP2-4分子量为3.80×103,由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为1.62∶9.13∶7.29;多糖AP2-5分子量为2.83×103,由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为6.83∶8.57∶10.22∶1.78。3.多糖AP1-1的主链由→6)-α-D-Glcp-(1→和→2,6)α-D-Galp-(1→组成,支链由α-D-GalpA-(1→,→5)-α-L-Araf-(1→和α-D-Man-(1→组成;多糖AP1-3的主链由→2,3)-α-L-Rhap-(1→,→2,6)α-D-Manp-(1→,→3)-β-D-Galp-(1→和→3,6)α-D-Galp-(1→组成,支链为α-D-Glcp-(1→;多糖AP2-3的主链由→2)-α-L-Rhap-(1→,→5)-β-L-Araf-(1→,→2,6)-β-D-Glcp-(1→,→6)-β-D-Glcp-(1→和→6)-β-D-Galp-(1→组成,支链由→2)-α-L-Rhap-(1→,→6)-β-D-Manp-(1→和β-L-Araf-(1→组成。结论:1.分离纯化得到的11个多糖组分经检验证明纯度较好,说明采取的分离纯化方法切实可行。2.经结构分析可知刺糖多糖各组分多为有分枝的杂多糖。
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