目的：构建人结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）和基质金属蛋白酶组织抑制因子1（tissue inhibitor of metalloproteinases 1,TIMP1）基因的腺相关病毒（adeno associated virus, AAV）双表达重组质粒pSNAV₂-CTGF-IRES-TIMP1，体外检测生物学活性后进行病毒包装，并评价CTGF和TIMP1基因逆转人腰椎间盘退变的可行性。方法：对构建的重组质粒pSNAV₂-CTGF-IRES-TIMP1进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序，用脂质体介导重组质粒转染人胚肾293（HEK293）细胞，通过双重免疫荧光、Western blot、MTF法和EHSA等方法检测细胞因子CTGF和TIMP1蛋白的生物学活性。在此基础上进行病毒颗粒包装。rAAV₂-CTGF-IRES-TIMP1感染体外分离培养并鉴定的人退变腰椎间盘髓核细胞，通过细胞形态学观察、氯胺T法、免疫组织化学法、³⁵S整合法以及Antonopoulos法等检测CTGF和TIMP1对于人退变腰椎间盘髓核细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原合成的影响。结果：成功构建了含有完全正确的CTGF和TIMP1基因序列的AAV重组质粒。包装出的具有生物学活性的rAAV₂-CTGF-IRES-TIMP1病毒能够感染人退变腰椎间盘髓核细胞。CTGF和TIMP1联合可以促进髓核细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成。结论：腺相关病毒介导的CTGF和TIMP1可以通过促进髓核细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原合成来延缓或逆转腰椎间盘退变。