猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemicdiarrhea virus，PEDV）引起的一种严重的病毒性传染病。该病的特征是可以导致哺乳仔猪发生严重的腹泻、呕吐、脱水，并且致死率极高。本病在欧洲和亚洲传播非常广泛，每年都会对一些国家和地区造成严重的经济损失，给养猪业带来了巨大的危害。所以对于猪流行性腹泻的防治是当务之急。对于大多数的病毒性腹泻疾病来说，防治措施一般选择疫苗免疫。虽然人们使用了现有的疫苗来防治猪流行性腹泻病毒，但是该病毒还是出现在了免疫猪群中。猪流行性腹泻病毒所造成的损害仍然在持续加重。近年来，有关猪流行性腹泻病毒疫苗的研究已经取得了一定的进展，但目前所面临的主要问题是猪流行性腹泻病毒在种毒制备的过程中，繁殖条件复杂，病毒在细胞中培养的病毒滴度低，这些都严重妨碍了猪流行性腹泻疫苗的研制。本研究为了提高猪流行性腹泻病毒的繁殖滴度，对猪流行性腹泻病毒的培养条件进行优化并连续体外传代培养，分别从胰酶浓度、吸附时间和培养方式三个方面对猪流行性腹泻病毒的传代培养条件进行了摸索。实验发现最适的胰酶浓度范围为1-5μg/mL，并且最适的培养方式为吸附液吸附1.5h后弃去吸附液，加入维持液培养72h收毒。通过以上的培养方式最终提高了病毒的滴度(TCID₅₀)，TCID₅₀为10^6.17/0.1mLTCID₅₀，从而降低了该病毒的致病性。本研究进一步对PEDV HLJBY毒株的理化特性的探究，发现PEDV HLJBY毒株对50℃及以上的温度敏感，在此温度以上即可达到热灭活的效果；该毒株还对氯仿敏感；PEDV HLJBY毒株的pH比较稳定，将该毒株的pH调至3，再调至原pH值，病毒的滴度并没有明显变化。本研究参照《中华人民共和国兽药典》2010年版第三部的要求对该病毒的特性进行了系统研究与记录。根据《中华人民共和国兽药典》的要求进行细胞和种毒的纯粹检查，结果显示PEDV培养用Vero细胞和PEDV种毒中并无细菌、霉菌、支原体和外源病毒的存在。此研究为PEDVHLJBY株可作为弱毒疫苗候选株的研究提供了进一步的参考资料，为猪流行性腹泻的预防提供了理论依据。