蒙药古日古木-13对实验性变应性鼻炎鼻黏膜组织重塑的影响

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目的:本课题通过建立AR大鼠动物模型,观察并探讨蒙药古日古木-13对变应性鼻炎大鼠症状及鼻黏膜重塑的干预作用,为临床推广应用蒙药治疗变应性鼻炎提供实验依据。  方法:选用健康清洁级Wistar大鼠作为实验动物,随机分为6组,即空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、孟鲁司特组(C组)、蒙药古日古木-13高剂量组(D组)、蒙药中剂量组(E组)、蒙药低剂量组(F组),每组10只。用卵清白蛋白(OVA)建立AR大鼠模型,在鼻部激发末次,采用记分法记录变应性鼻炎大鼠鼻分泌物量、喷嚏次数及鼻痒程度,各项指标采取叠加量化记分,总分超过5分提示动物造模成功。末次激发后进行灌胃给药,C组予西药孟鲁司特灌胃,D、E、F组分别予蒙药高、中、低剂量灌胃,空白组及模型组予生理盐水进行灌胃,每日一次,共28天。给药期间每隔14天观察并记录给药后30min内行为,观察药物对大鼠行为症状的影响并对不同药物的症状改善程度进行比较。末次给药24小时后,将各组大鼠麻醉腹主动脉取血,用酶联免疫吸附法检测血清中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白含量;剥离大鼠鼻黏膜组织并进行石蜡包埋、组织切片,HE染色用以进行用药前后及各组间鼻黏膜的病理变化和嗜酸性粒细胞数量变化,对切片行免疫荧光试验用以比较各组间鼻黏膜组织中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白的释放情况。在实验第28天、第49天分别取模型组大鼠一只进行解剖取鼻黏膜组织进行HE染色,观察黏膜重塑情况。  结果:1.大鼠一般情况:致敏前各组大鼠均无异常现象,皮毛光泽,精神良好,活动自如,反应灵敏,饮食及二便正常,无喷嚏、流涕、搔鼻、呼吸急促等症过敏性鼻炎(和/或过敏性哮喘)的症状和体征。基础致敏的第1至6天,部分大鼠出现精神萎靡、喜静恶动,饮食减少、拱背等表现,但之后8天内诸表现逐渐缓解。第15天至17天,OVA生理盐水溶液激发的大鼠部分出现急躁、喷嚏、搔鼻等症状。第18至第27天,大鼠急躁表现消失反而表现为嗜睡乏力,OVA激发的大鼠的喷嚏、搔鼻症状逐渐加重,激发后30分钟内症状尤为显著,个别鼠甚至出现呼吸急促、哮鸣音;毛发黯淡、炸毛,饮食减少,部分大鼠有轻微腹泻。用药后,各药物组大鼠较用药前精神逐渐恢复,嗜睡乏力症状缓解,饮食增加,喷嚏、搔鼻次数减少,毛发脱落减少。实验期间,空白对照组大鼠表现无明显变化。除空白组外,各组大鼠症状体征评分均大于5分,提示变应性鼻炎模型建立成功;对第49天模型组大鼠鼻黏膜组织进行观察,提示模型组大鼠鼻黏膜已发生重塑。  2.各组大鼠喷嚏、搔鼻症状的比较:用药后孟鲁司特组、蒙药高、中、低剂量组大鼠喷嚏、搔鼻次数均明显少于模型组(P<0.05,有统计学意义),提示孟鲁司特、蒙药古日古木-13可明显改善过敏性鼻炎的症状。  3.检测指标变化情况:治疗后,各治疗组大鼠鼻黏膜组织中嗜酸性粒细胞数量和血清中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白浓度明显低于模型组(P<0.05,有统计学意义),但以蒙药中剂量对鼻黏膜中EOS的抑制作用最优;各治疗组大鼠组织中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白数量明显少于模型组(P<0.05,有统计学意义),表明孟鲁司特和蒙药古日古木-13均对大鼠鼻黏膜中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白的释放有很好的抑制作用。  结论:蒙药古日古木-13对AR大鼠的典型症状体征有很好的治疗作用,且能够下调AR大鼠血清ECP及组织中ECP和EOS的含量,从而抑制AR大鼠鼻黏膜重塑的发展。
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