【目的】
　　1.研究环黄芪醇对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。
　　2.研究环黄芪醇对地塞米松导致的MC3T3-E1细胞成骨分化抑制的影响。
　　3.研究环黄芪醇对MC3T3-E1细胞及地塞米松处理后细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响。
　　4.研究环黄芪醇对地塞米松导致的斑马鱼胚胎骨量下降的影响。
　　【方法】
　　1.体外培养前体成骨细胞MC3T3-E1，应用成骨诱导液(OIM)使其成骨分化。
　　2.通过CCK-8实验检测环黄芪醇对MC3T3-E1细胞生存率的影响；通过ALP染色及活性检测观察细胞早期成骨分化程度；通过茜素红染色和钙结节定量检测细胞晚期成骨分化程度；通过qRT-PCR和WesternBlot检测成骨相关基因和蛋白的表达情况以及Wnt/β-catenin信号通路的激活状态。
　　3.将不同浓度环黄芪醇作用于MC3T3-E1细胞，检测环黄芪醇对细胞ALP活性、矿化、成骨相关基因表达是否有促进作用。
　　4.将1μM地塞米松作用于MC3T3-E1细胞，使其处于成骨分化抑制状态，作为糖皮质激素性骨质疏松的成骨细胞体外模型。
　　5.将不同浓度环黄芪醇作用于地塞米松处理的MC3T3-E1细胞，检测环黄芪醇对地塞米松所致细胞成骨分化障碍是否有改善作用。
　　6.将端粒酶抑制剂TMPyP4作用于MC3T3-E1细胞，观察在端粒酶功能被阻断之后，环黄芪醇是否还能发挥其作用，由此探究环黄芪醇是否通过端粒酶发挥作用。
　　7.将地塞米松(20μM)作用于斑马鱼胚胎构建糖皮质激素性骨质疏松斑马鱼模型，再将不同浓度的环黄芪醇作用于此模型，观察环黄芪醇对此模型是否有缓解作用。
　　【结果】
　　1.当浓度处于0.01μM~50μM范围内，环黄芪醇对MC3T3-E1细胞生存率没有显著影响。
　　2.当浓度处于0.01μM~50μM范围内，环黄芪醇对MC3T3-E1细胞的ALP活性、矿化、成骨相关基因表达水平随着浓度增加有明显的促进作用。
　　3.1μM地塞米松对MC3T3-E1细胞的ALP活性、矿化、成骨相关基因及蛋白表达有明显的抑制作用。
　　4.当浓度处于0.01μM~50μM之间，环黄芪醇明显减轻地塞米松对MC3T3-E1细胞成骨分化的阻碍作用。
　　5.当浓度为5μM的端粒酶抑制剂TMPyP4作用于MC3T3-E1细胞时，环黄芪醇促进成骨分化和缓解地塞米松所致成骨分化抑制作用被阻断。
　　6.环黄芪醇上调MC3T3-E1细胞Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin蛋白的表达，并且对地塞米松导致的β-catenin蛋白表达水平下降有明显改善作用。
　　7.20μM的地塞米松可致斑马鱼骨量下降，环黄芪醇对地塞米松所致斑马鱼骨量下降有明显改善作用。
　　【结论】
　　1.环黄芪醇通过端粒酶途径和Wnt/β-catenin途径促进MC3T3-E1细胞成骨分化及缓解地塞米松对细胞所致成骨分化障碍。
　　2.环黄芪醇对糖皮质激素所致斑马鱼骨量下降有缓解作用。