该研究的主要内容是通过发酵动力学的角度对发酵条件进行优化,确定葡萄糖、环氧琥珀酸、polypepton的流加方式,提高菌体的产酶量.环氧琥珀酸水解酶是一种胞内酶,提高酶的产量可以从提高菌体浓度和提高比酶活两方面入手,菌体浓度的提高和葡萄糖的利用有很大关系,发酵过程中碳源葡萄糖浓度过高对菌体的生长会有抑制作用,通过实验确定培养基中初始葡萄糖浓度为5g/L,在消耗殆尽后以1.25-1.35g/Lh的速度流加,可以将菌体浓度提高到5g/L以上.菌体比酶活的提高取决于诱导物环氧琥珀酸和polypepton的流加方式、流加速率.环氧琥珀酸的流加采用两段式流如:诱导前期,流加速率为1.2g/Lh,诱导后期流加速率为3g/Lh,诱导总时间约为18h.实验中发现菌体产生的环氧琥珀酸水解酶在发酵过程中会发生降解,通过加入有机氮源polypepton来减少酶的降解,polypepton除了在初始培养基中加入外,还在诱导后期以0.1g/Lh的速度流加至发酵结束.通过诱导物环氧琥珀酸的流加和polypepton的流加菌体的产酶得到很大的提高.整个发酵过程约38-40h,分生长、诱导两个阶段,生长期约20h,诱导期约20h,发酵结束时的比酶活达到700u以上,菌体浓度达到了8g/L的水平,比原水平有较大的提高.