色米即有颜色的糙米,是特种水稻的一种。色米以其独具特色的口味、五彩缤纷的颜色以及丰富的营养日益受到人们的青睐。营养成分中富含多种对人体有益的维生素及微量元素。另外,色米中含有的酚类物质赋予了色米较强的抗氧化性。同时,有关色米减肥的研究也有相关报道,但其抑制脂肪生成和积累的机理还没有得出定论。该课题的目的是研究七种不同品种的色米提取物中酚类物质的抗氧化性物质基础以及抑制脂质生成与积累的作用机理。以间充质干细胞为模型进行成脂分化,阐述其潜在的调节脂质生成和积累的机理,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime-PCR)研究脂肪细胞与脂代谢相关基因转录的影响,用来确定色米是否具有治疗或预防肥胖的功效。本实验主要包括三大部分。第一部分对原料色米进行提取,测定提取物中总酚含量和黄酮含量以及其抗氧化活性,采用多种自由基体系如DPPH.自由基、ABTS+自由基及超氧自由基O2-·的清除能力。结果表明总酚含量和黄酮含量越高的品种,具有越强的抗氧化能力,具体表现在其清除自由基的能力。色米中总黄酮对总酚有一定的贡献,二者均对其抗氧化活性有很大的贡献,三种自由基间也存在较高的相关性。第二部分利用紫外分光光度法对提取物酚类物质进行全波长扫描以及高效液相色谱法进行成分分析。结果显示酚类物质是其抗氧化的物质基础,主要有没食子酸、儿茶素、阿魏酸,香草酸以及咖啡酸等。第三部分利用C3H10T1/2-Clone8间充质干细胞进行体外研究,以确定色米提取物抑制脂肪形成过程的作用,对诱导分化后的细胞形成的内脂滴进行油红O染色和量化法,Realtime-PCR测定与脂代谢相关基因(PPARy,C/EBPα,Fabp4,AdipoQ,Plin1)mRNA的表达量,分析脂肪的分化程度。结果表明:添加色米提取物处理后的实验组,其细胞脂代谢相关基因表达与阳性对照组相比均出现不同程度的下调,样品处理组各基因表达水平与酚类含量趋势一致;利用蛋白质印记法(Western Blot)对成脂分化所必需的过氧化物酶体增殖剂激活受体PPARγ蛋白检测,其结果表明PPARγ蛋白在阳性对照组(ADM)表达量最大,样品处理组中GER最小,其次是RER,说明不同色米提取物对成脂分化过程有不同程度的抑制,色米提取物能够通过调节PPARγ蛋白的表达抑制脂质的生成与积累。