目的:1.确认外泌体是否会促进烫伤创面的愈合。2.初步探讨外泌体促进烫伤创面愈合的相关机制。方法:1.采用试剂盒法分离外泌体,并通过免疫印迹法检测外泌体标志蛋白,透射电镜观察外泌体形态及纳米颗粒跟踪分析仪测定外泌体粒径。2.选取NIH小鼠建立皮肤深二度烫伤模型,通过HE染色判断造模是否成功。3.烫伤皮肤皮下注射血清外泌体,定期测量各组小鼠烫伤区域面积,评估外泌体的疗效。4.取烫伤部位皮肤进行HE染色,观察皮肤组织的病理变化。5.荧光标记法观察外泌体能否进入皮肤组织细胞。6.MTT法检测血清外泌体对成纤维细胞增殖的影响。7.流式细胞术检测血清外泌体对表皮细胞凋亡的影响。8.细胞划痕实验检测血清外泌体对表皮细胞迁移的影响。9.蛋白免疫印迹检测烫伤组,正常组和外泌体组皮肤的AKT磷酸化水平。10.细胞免疫荧光检测血清外泌体对血管内皮细胞VEGF的影响。11.实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测血清外泌体对VEGF m RNA的影响。结果:1.试剂盒法分离的的大鼠血清外泌体均表达外泌体标志蛋白:CD63,HSP70;粒径均一性良好,均127nm左右,呈双层膜结果。2.成功建立小鼠深二度皮肤烫伤模型。血清外泌体可以明显缩小烫伤疤痕的面积。且能有效修复皮肤的附属结构和改善胶原纤维的排列。3.血清外泌体能促进小鼠原代培养成纤维细胞的增殖。4.血清外泌体能促进表皮Hacat细胞的迁移。5.血清外泌体能抑制热损伤诱导的Hacat细胞凋亡。6.血清外泌体能逆转烫伤诱导的皮肤组织AKT去磷酸化。7.血清外泌体能提高血管内皮EA.hy926细胞VEGF蛋白的含量。8.血清外泌体抑制血管内皮EA.hy926细胞的VEGF m RNA的表达。结论:1.血清外泌体能促进烫伤小鼠皮肤的愈合。2.血清外泌体可能通过诱导AKT磷酸化促进细胞增殖和迁移,同时通过VEGF蛋白促血管新生发挥其促创面愈合的作用。