降低蝴蝶兰组培苗褐变率的技术研究

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蝴蝶兰具有较高的观赏价值和经济价值,国内外花卉市场需求量较大。现阶段蝴蝶兰的种苗繁殖多采用组织培养来进行,但蝴蝶兰组织培养过程中容易发生褐变现象,这严重阻碍了蝴蝶兰种苗的规模化生产。为了减少蝴蝶兰组培苗生产中褐变现象的发生,降低褐变率,提高蝴蝶兰种苗生产的质量,增加蝴蝶兰种苗生产企业的经济效益,我们以陕西西安卉杉生态科技有限公司近年引进的5个蝴蝶兰主栽品种(“大辣椒”、“阿里山姑娘”“满天红”“火凤凰”“帝王”)为试材,对影响蝴蝶兰组织培养过程中造成褐变的各种因素,包括外植体的品种差异、外植体的生长时间、外植体切割的长度、消毒试剂的浓度和消毒时间、培养基的pH值、无机盐浓度、培养时的光照强度、光照时间、培养温度等进行了试验,获得如下主要结论:1.相同培养条件下,蝴蝶兰品种不同,组培过程中的褐变率不同,绒花型的“阿里山姑娘”褐变率大于红花型的“大辣椒”,“大辣椒”又大于小花系列的“满天红”,且差异显著。同一品种的褐变率随培养时间的推移也在不断增大,呈递增趋势。因此,为降低蝴蝶兰组培褐变率,宜选取褐变率最低的“满天红”品种进行蝴蝶兰组培。2.以“大辣椒”蝴蝶兰为试材,分别选取生长期为30d、45d、60d、75d和90d的花梗进行组培。试验结果表明,花梗生长期为30d的褐变率最低,花梗生长期为45d的次之,花梗生长期为90d的褐变率最高。对“大辣椒”生长期为45d的花梗不同长度(1cm、2cm、3cm、4cm、5cm、6cm、7cm、8cm、9cm)的切段进行组培,发现长度为3cm的一组褐变率最低。综合考虑其他因素,蝴蝶兰组培宜选择生长期为45d的花梗,并以3cm大小为佳。3.采用不同浓度的氯化汞(HgCl2)溶液对“大辣椒”外植体进行消毒处理,结果表明,100mg/L时的消毒效果最好,褐变率最低。处理12min或更长时间,污染率最低;然而随着处理时间的延长,褐变率增加。因此,蝴蝶兰组培宜选择100mg/L的氯化汞处理12min。4.培养基适宜的pH值为5.4~5.5。Fe2+最适宜的浓度一般是38mg/L,Ca2+的适宜浓度为100mg/L,K+的适宜浓度为1900mg/L。Cu2+和Zn2+的适宜浓度为0.025mg/L。5.光照条件对蝴蝶兰“大辣椒”组织褐变影响较大,越弱的光照(500~1000Lx)褐变明显较轻,随着光照强度增加,褐变很快增加;黑暗预处理10d的蝴蝶兰外植体的褐变率较暗处理5d和15d的低。“帝王”品种在2000Lx条件下每天不同时长处理,光照时间越短,组织褐变越轻。因此,降低蝴蝶兰组培褐变率的的方法是:在200~500Lx的低光照强度下培养7~14d,或进行7d的暗光处理;在1500~2000Lx光照条件下,每天按照2、4、6、8、10、12小时的梯度逐渐增加光照时间培养。初期在15~25℃的低温下培养7~14d,后期在25~28℃的温度下培养褐变率较低。
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