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拟除虫菊酯类农药由于具有较高的杀虫活性和低的哺乳动物毒性,被广泛应用在农业、林业、畜牧业及家庭卫生中。尽管拟除虫菊酯类农药对于人类是相对安全的,但如果拟除虫菊酯类农药大量的暴露,则会引起对人类免疫系统的危害,如造成淋巴结和脾脏的伤害甚至于癌变,因为这些潜在危害的存在,建立一种灵敏、快速、有选择性的拟除虫菊酯类农药残留检测方法是十分必要的。免疫学检测技术是农药及其代谢物重要的快速分析方法之一,具有灵敏度高,特异性强等特点。本文进行了Ⅱ型菊酯类农药免疫学检测技术的研究,主要研究结果如下:1.利用高锰酸钾氧化,将氯氰菊酯原药分子结构中环丙烷部分的双键结构打开,引入-COOH活性基团,设计合成了模拟氯氰菊酯特征结构的半抗原(RS)-α氰基-3-苯氧基苄基(RS)-cis,trans-2,2-二甲基-3-羧基-环丙烷羧酸酯;利用活性酯法将半抗原与牛血清蛋白和卵清蛋白进行偶联,制备人工抗原。半抗原通过核磁共振、红外光谱扫描、高分辨质谱等鉴定,人工抗原通过紫外吸收扫描法鉴定,证明半抗原和人工抗原均为设计所需产物。2.以半抗原-BSA和半抗原-OVA作为免疫原,免疫新西兰大白兔,获得了多克隆抗体,经间接非竞争ELISA法检测表明以半抗原-BSA免疫兔子制备的抗血清效价达1:25600,利用方阵滴定法确定了包被原与抗血清的工作浓度:包被原的工作浓度为0.5μg/ml,抗血清稀释度为1:12000。3.用抗血清建立了间接竞争ELISA (IC-ELISA)检测方法。确定了IC-ELISA检测方法中助溶剂丙酮的使用量应小于5%。以IC-ELISA法检测免疫原,结果表明该抗体对免疫原有很好的识别作用,免疫原对的抗体的I50为0.048μg/ml。该抗体对小分子农药氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、氟氯氰菊酯都有识别作用,特别是对氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯的灵敏度较高,两者的I50分别为1.1553μg/ml和1.7095μg/ml,I10分别为0.0117μg/ml和0.0485μg/ml。