DGKs（diacylglycerol kinases）,又被称为二酰基甘油激酶,是一类特异、保守的脂质激酶家族成员,其主要功能是将二酰基甘油（DAG）磷酸化产生磷脂酸（PA）。DAG主要通过两种途径产生:一是由磷脂酶C（PLC）水解4,5-二磷酸肌醇（PIP2）而来;一是通过磷脂酸磷酸酶（PAP）移去PA的磷酸基团产生。PA和DAG都在脂类的生物合成和信号途径中扮演重要的角色,由DGKs和PAPs调节的PA和DAG之间的动态平衡就显得尤为重要,因此对于DGKs的功能研究也是非常重要的。在拟南芥中AtDGKs共有七个家族成员。已有研究发现拟南芥AtDGKs在多个部位表达,包括根、叶片和花等,并且其表达还会受到寒冷和伤害的诱导,在植物抵御寒冷刺激中发挥作用。DGKs在动物中的研究较为广泛,而在植物生长发育中的功能却鲜有研究。本论文运用分子生物学和反向遗传学的方法对At DGKs的功能进行初步研究,获得结果如下:1.N端删除的DGK^a+c和DGK^a蛋白定位于细胞质中通过表达荧光蛋白融合载体,利用激光共聚焦显微镜观察发现,在拟南芥稳定的转基因植株的叶片和根中,DGK^a+c和DGK^a蛋白主要定位于细胞质中。2.过表达YFP-DGK^a+c影响胚胎发育以及花发育和角果着生次序通过对YFP-DGK^a+c过表达的转基因植株表型的分析与观察,发现该基因可能调控胚胎发育过程。YFP-DGK^a+c的过表达植株在胚胎发育的各个时期都存在不同程度的缺陷,胚胎细胞的分裂紊乱,影响胚胎的早期发育和根极的建立;在胚后发育阶段,YFP-DGK^a+c蛋白过量表达对于角果着生次序,茎干的正常发育以及花发育都有一定的影响。这些结果说明过表达YFP-DGK^a+c会影响植物正常的生长发育过程。3.过量表达DGK^a+c影响植物的胚胎发育过程利用胚胎特异表达的RPS5A启动子,构建了DGK^a+c过表达的载体,发现与YFP-DGK^a+c蛋白过量表达一样,RPS5A-DGK^a+c植株后代的胚胎发育过程也受到影响,胚胎细胞的不正常分裂对于胚胎的早期发育及根极的建立过程都有一定的影响。4.AtDGKs T-DNA插入突变体影响侧根的发育通过对AtDGKs的T-DNA插入突变体根的表型进行分析,发现插入在第一个外显子上的突变体dgk2-3主根长度明显短于野生型,并且相对于野生型侧根密度有一定增加。这些结果说明该基因参与调控拟南芥根的发育,尤其是侧根的发育。以上结果显示,At DGKs在植物胚胎发育过程中起着重要的作用,在胚后发育阶段,对根发育尤其是侧根发育以及花与角果着生次序具有一定的影响。这些都说明At DGKs在拟南芥的生长发育过程中都发挥重要的作用。