苦参碱对急性白血病TF-1细胞株SALL4基因及下游Wnt信号通路的影响

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目的:探讨苦参碱对人红白血病细胞TF-1细胞株的增殖抑制作用,以为对SALL4基因和下游Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:MTT法检测不同浓度的Mat对细胞的增殖抑制率情况;流式细胞术检测药物作用后的细胞凋亡率变化情况;实时荧光定量PCR检测TF-1细胞SALL4基因,及Wnt通路中β-catenin、C-myc、CyclinDI基因的表达。Western Blotting检测SALL4蛋白表达情况。结果:1.MTT结果显示苦参碱对TF-1细胞的增殖起抑制作用(P<0.05),并且在实验浓度范围内,抑制率呈时间及浓度依赖,48hIC50为1.1413g/L,72h IC50为0.7998g/L。2.苦参碱诱导TF1凋亡呈浓度依赖关系,经1.0、2.0g/L的Mat处理后,TF1细胞凋亡率分别为(41.15±11.75)%和(60.15±4.84)%,与对照组(19.06±1.41)%相比差异具有统计学意义(P<0.05)。3.荧光定量PCR显示经过苦参碱作用48h后的TF-1细胞中的SALL4基因及Wnt通路中β-catenin、C-myc、Cyclin DI基因的表达量有不同程度的下降(P<0.05);4.SALL4与β-catenin、C-myc、Cyclin DI基因表达量做相关分析,其相关性具有统计学意义(rs=0.912,P<0.01; rs=0.818,P<0.01;rs=0.832,P<0.01)。5.Western Blotting结果表明Mat可以抑制SALL4蛋白表达。结论:苦参碱能抑制TF-1细胞的增殖,并降低SALL4基因及蛋白表达、同时抑制Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因β-catenin、C-myc、CCND1的表达,从而起到抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。
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