目前，食管癌的分子靶向治疗已进入I/II期临床试验阶段，所用药物主要包括受体激酶抑制剂和肿瘤血管生成抑制剂。然而，就目前的实验数据来看，多数药物对食管癌的疗效并不显著，且研究主要集中在西方国家常见的食管腺癌及胃食管交界癌，而中国等亚洲国家相对高发的食管鳞癌(ESCC)方面的分子靶向治疗药物研究尚十分缺乏，因此，探索和开发针对ESCC的分子靶向治疗药物迫在眉睫。F806是从国内土壤链霉菌FIM-04-806发酵液中提取得到的天然化合物。初步的实验数据表明，F806具有潜在的抗癌活性。然而，在ESCC中，其体内外抗癌活性、安全性以及分子作用机制等均不清楚。基于此，在本文中，我们利用ESCC等多种恶性肿瘤细胞系与非肿瘤细胞系，同时建立荷瘤鼠模型，综合评价了 F806的体内外抗 ESCC等的活性与安全性；在此基础上，再通过联合应用稳定同位素标记(SILAC)和蛋白质谱等多种实验技术手段，深入揭示了F806的分子作用机制及其潜在的作用靶点，为将其作为抗ESCC候选药物，开展后续的开发研究提供了充分的理论依据。　　首先，在以ESCC为主的各种恶性肿瘤细胞系与非肿瘤细胞系中，应用MTT法初步筛选了F806对细胞分裂增殖的影响。实验结果显示，1) F806对ESCC细胞等13种癌细胞系的分裂增殖均有明显的抑制作用，72 h的IC50在0.83-16.43μM之间，表明拥有广谱抗癌活性；2) F806在抗癌活性剂量浓度下，对6种非肿瘤细胞系的抑制作用不明显。　　其次，通过联合应用荷瘤鼠模型、病理学细胞形态观察与生化分析等实验技术手段，探讨了F806的体内抗肿瘤活性与毒性。实验结果表明，1)在ESCC荷瘤鼠模型中，F806在4 mg/kg和8 mg/kg的剂量浓度下，能够显著抑制癌细胞的成瘤能力，显示其拥有很强的体内抗肿瘤活性；2)在抑制荷瘤鼠成瘤的过程中，F806有效剂量浓度并未对荷瘤鼠的肝、肾、心和脑等器官组织呈现明显毒性作用。　　再次，以两种食管癌细胞系为模型，运用透射电镜、DNA Ladder琼脂糖凝胶电泳、TUNEL与细胞周期分析、蛋白免疫印迹等实验技术手段，研究发现，在 ESCC细胞中，F806可通过活化Caspase-9/12介导的线粒体/内质网应激途径，触发癌细胞凋亡。在此基础上，进一步通过综合运用“失巢凋亡”分析、粘附实验、免疫荧光、免疫共沉淀和蛋白免疫印迹等实验技术手段，阐明了F806能够抑制ESCC细胞中整合素β1的活性，阻断整合素信号通路活化，抑制癌细胞中粘着斑的形成，影响癌细胞与 ECM之间的粘附，诱发癌细胞发生“失巢凋亡”，发挥抗癌活性。　　再者，以ESCC细胞系EC109为模型，运用SILAC与蛋白质谱等实验技术，鉴定了F806抑制ESCC细胞生长的差异蛋白表达谱。实验结果显示，共有1931个蛋白分子被鉴定并定量，其中181个蛋白发生显著下调表达，119个蛋白发生显著上调表达；运用Gene Ontology(GO)在线软件对发生显著差异表达的蛋白进行注释分析，结果表明，F806作用的差异表达蛋白与细胞增殖等生物学过程密切相关；应用SubpathwayMiner软件对这些差异表达蛋白相关信号通路进行富集分析发现，在富集的37个信号通路与56个子通路中，发生下调表达的 GRB2可能是 F806发挥其抗癌作用的关键节点分子。接下来，通过qRT-PCR、蛋白免疫印迹与荷瘤鼠动物模型等实验技术手段，验证了 F806的确能够诱导GRB2表达下调。并且，以shRNA稳定敲降 GRB2的ESCC细胞建立荷瘤鼠模型，确认GRB2表达下调能够抑制ESCC细胞生长，进一步验证了F806通过抑制GRB2表达发挥抗癌作用这一实验事实。　　最后，通过组织芯片、IHC染色和生存率分析等手段，阐明了GRB2在食管癌中的表达模式以及与患者生存率的关系，确认其可作为抗癌治疗的靶点。实验结果表明，1)与配对的相对正常的食管上皮相比，GRB2在172例ESCC组织的胞浆中呈显著过表达；2) GRB2过表达与ESCC患者的淋巴结转移呈显著正相关；3) GRB2过表达与ESCC患者生存时间缩短显著正相关，是判断食管癌患者不良预后的独立指标。　　总结上述诸实验结果，我们得出如下科学结论：F806作用于ESCC细胞，不仅可以有效阻断整合素β1的活性，同时还可以导致 GRB2表达显著下调，进而抑制癌细胞粘附与生长，发挥其抗癌活性。