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番茄煤霉病(TomatoCercosporaleafmold)作为番茄生产上近年发生的一种新病害,近年来在保护地番茄生产中,某些品种上,病害发生呈上升趋势。本文针对番茄煤霉病病原菌的生物学特性、病菌毒素的活性、病菌侵染机制和病害侵染循环规律进行了比较系统的研究。
1.初步鉴定明确了番茄新见病害的归属。
对采自河北省唐山市的番茄病叶上的病原菌进行了分离鉴定,并经柯赫氏法则进行证病,确定该病原菌为番茄煤污尾孢霉(Cercosporafuligenae);并对该病害症状和病原菌形态特征进行了描述。初步确定该病为番茄煤污尾孢霉引起的番茄煤霉病。
2.对番茄煤污尾孢霉菌的生物学特性进行了较系统的研究。
病原菌生物学特性研究表明,番茄煤污尾孢霉在不同培养基上菌丝生长速度存在明显差异,以燕麦片培养基、PSA培养基为最适宜培养基,其次为PDA和果煎汁培养基;病菌菌丝生长温度范围10~35℃,最适温度为28℃;病菌致死温度为56℃、10min。病菌在pH3~12范围均可生长,以pH3~4为最适;光照对病菌菌丝生长影响较小,病菌在黑暗条件下较易产孢。分生孢子萌发温度为10~40℃,最适温度为25℃;孢子萌发对营养有特殊要求,在浓度均为1%的木糖、果糖和葡萄糖中萌发较好;病菌分生孢子在水滴中萌发最好;在pH2~12范围可萌发,以pH6为最适;病菌分生孢子致死温度为50℃、10min。
3.研究测定了番茄煤污尾孢霉产生的毒素及其致病特性。
番茄煤污尾孢霉经体外培养可产生致病毒素,病原菌毒素提取和生物活性测定研究表明:(1)硫酸铵分级沉淀法适合提取番茄煤污尾孢霉菌毒素,硫酸铵浓度80%提取番茄煤污尾孢霉菌毒素效果最好。不同极性的有机溶剂提取结果表明:该毒素化合物具有较高极性,而且是大分子化合物。(2)病菌毒素生物活性测定结果表明,分别以1~500×浓度的毒素针刺接种番茄叶片,均可产生褪绿斑,说明毒素对寄主叶片细胞有破坏作用。毒素对叶片的损伤程度与其浓度有密切的关系;同时发现毒素对种子萌发和胚根生长都具有一定的抑制作用。(3)对毒素的化学本质初步分析结果表明,番茄煤污尾孢霉菌致病毒素具有较高的热稳定性;缓冲液透析结果表明,该毒素为大分子化合物,结果与有机溶剂萃取结果一致;紫外分光光度计测定紫外吸收曲线,毒素在200~400nm范围内有一个最高吸收峰。(4)病菌毒素中蛋白和可溶性糖含量的测定结果表明,蛋白含量为144.4μg·ml-1,可溶性糖含量为15.88μg·ml-1。据此初步认为煤污尾孢霉菌毒素为糖蛋白,主要成分为蛋白质。(5)该毒素对较多寄主具有破坏作用,为非寄主专化性毒素。
4.初步探讨了番茄煤霉病的侵染循环特点。
病害侵染循环研究结果表明,温度条件与病原菌存活时间具有相关性,病残体是病原菌的越冬场所;病原菌侵染寄主速度快,对寄主植物组织造成伤害,在25℃的温度条件下,病害的潜育期为4~5d。
5.进行了15种杀菌剂室内抑菌效果测定。
室内杀菌剂抑菌试验结果表明,供试的15种杀菌剂间对病菌的抑菌效果存在明显差异:甲霜灵、加农、杀毒矾、霜脲氰抑菌效果较好,抑菌率均达到98.9%;15种杀菌剂对孢子萌发的抑制作用均较好,抑制率均达到98%以上。由此为农业生产上防治该病提供了理论依据。