中度嗜盐菌NEAU-ST10-9的多相分类鉴定

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耐(嗜)盐微生物因为其生长环境特殊,因此使得该类微生物具备非同一般的遗传构造和生理代谢调节机制进而引发国内外学者和科研工作者对该类微生物的广泛关注。该类微生物其独特的生理代谢特征使得其成为生物界中重要的种质资源。对耐(嗜)盐微生物新种的关注和研究,不仅仅扩大了耐(嗜)盐功能性基因种质资源库,而且对开发利用盐碱土壤,改造传统农作物,促进种植业生产发展等具有深远意义。本论文对本实验室于松嫩平原盐碱土壤中分离出的中度嗜盐菌NEAU-ST10-9进行了多相分类和生物多样性分析研究。对通过分离筛选出的菌株NEAU-ST10-9进行系统发育分析,该分析主要是以16S rDNA、持家基因gyr B和rpoB为基础进行;并且对试验菌株的生理生化特性、形态学特征、化学分类特征和基因型特征进行分析,从而获得试验菌株的多样性信息。通过分析我们得知实验菌株NEAU-ST10-9隶属于动性球菌属(Planococcus),是动性球菌属(Planococcus)的潜在新种。本研究通过对实验菌株NEAU-ST10-9表型特征进行分析、化学分类特征进行鉴定以及基因型特征进行比对分析。分析结果表明:被检测菌株是好氧的细菌;是革兰氏阳性细菌;菌体是球状的;菌落光滑且不透明的橙色凸起;在温度4-50℃之间都可以生长,30℃时为试验菌生长最好;能够在盐浓度2-10%范围内生长,盐浓度为4%时生长最好;能够在pH 6.0-10.0范围之间生长,pH为7.0是试验菌的最佳生长pH;试验菌NEAU-ST10-9的主要呼吸醌是MK-7和MK-8两种类型;含有的脂肪酸主要是C15:0 anteiso为42.18%和C17:0 anteiso为3.44%两种饱和脂肪酸以及C16:1ω7c alcoho为l8.15%和C17:1ω9为7.97%两种非饱和脂肪酸;细胞壁水解分析表明菌株NEAU-ST10-9细胞壁肽聚糖氨基酸属于L-Lys-D-Glu;双磷脂酰甘油、磷脂酰胆碱、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、和两种未知脂类共同构成了试验菌的主要极性脂类;基因组序列中G+C碱基所占的百分比是45.2%;通过16S rDNA基因序列为基础构建系统发育树,对试验菌株进行分析,待鉴定菌株NEAU-ST10-9属于Planococcus(动性球菌属)中一个新成员。试验菌株NEAU-ST10-9与其最近同源种模式菌株模式菌株Planococcaceae maritimus TF-9T 16S rDNA以及gyrB和rpoB基因序列经CliustX两两比对后,其相似性分别是99.1%、83.7%和87.0%。菌株NEAU-ST10-9与P.maritimus DSM 17275T、P.rifietoensis DSM 15069T、P.plakortidis DSM23997T、P.citreus DSM 20549T、P.maitriensis DSM 15305T、P.Salinarum KCTC 13584T、P.columbae DSM 17517T的DNA-DNA杂交同源性结果分别是55±1、52±1、48±2、42±1、37±1、35±1、32±2%,均低于70%。综合各方面特征分析结果,表明菌株NEAU-ST10-9归属于动性球菌属(Planococcaceae),而且是动性球菌属中一个新的分类单元,由于试验菌分离来自黑龙江省肇东市德昌,所以命名为德昌动性球菌(Planococcus dechangensis sp.nov),模式菌株NEAU-ST10-9T(=CGMCC 1.12151T=DSM 25871T)。
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