三株植物内生真菌的次生代谢产物研究

来源 :云南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tonytanli
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植物内生真菌普遍存在于健康植物组织中,种类繁多,分布广泛,并且能够产生丰富多样的具有多种生物活性的次生代谢产物,结构类型包括萜类、生物碱类、醌类、黄酮、甾醇等,许多化合物具有抗菌、杀虫、抗肿瘤、抗病毒等多种生物活性。本课题组在前期研究工作中,开展了部分植物内生真菌的生物活性筛选,获得了三株活性菌株YE3016、YE3048、YM355364。本文在此基础上,开展了活性菌株的鉴定及发酵产物的化学成分研究。主要研究结果如下:对菌株YE3016和YE3048进行了基于ITS序列的系统发育分析,结合真菌形态学特征观察,确定菌株YE3016为邬氏黄丝曲霉(Talaromyces wortmannii),菌株YE3048为球毛壳菌(Chaetomium globosumm)。菌株YM355364在前期工作中己确定为拟茎点霉属(Phomopsis sp.)。利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、RP-18反相柱层析等色谱分离技术,对这三株菌的发酵产物进行分离纯化,共分离得到22个化合物。采用核磁共振波谱、质谱、紫外光谱、红外光谱等现代分析手段,鉴定了全部单体化合物的结构,其中4个为新化合物。化合物的化学结构涉及蒽醌及其二聚体、甾醇、苯酞以及毛壳菌素等多种类型。对部分化合物进行了抗肿瘤细胞的活性检测,其中3个化合物具有一定的抗肿瘤细胞活性。对菌株YE3016进行了扩大发酵以及发酵产物的提取和分离纯化,共分离鉴定了7个化合物。经CA检索,化合物1为新化合物,命名为3-demethyl-3-(2-hydroxypropyl)-skyrin。其余化合物均为已知化合物,分别为skyrin(2),oxyskyrin(3),大黄素(4),1,3,6-trihydroxy-8-methyl-anthraquinone(5),麦角甾醇(6)和β-谷甾醇(7),其中化合物1,2,3为蒽醌二聚体,化合物4和5为蒽醌。化合物2目前仅报道过1H-NMR数据,本文补充了13C-NMR数据。生物活性检测表明,化合物1,2,3对人乳腺癌细胞MCF-7具有中等的抑制活性,IC50值分别为20.76±3.41,19.21±3.85和9.83±421μg/ml。通过对菌株YM355364的扩大发酵以及发酵产物的提取和分离纯化,共分离鉴定了12个化合物。经CA检索,化合物1,2,3为苯酞类新化合物,命名为phomopsinolide A (1), phomopsinolide B (2), phomopsinolide C(3),其余9个已知化合物分别为diaporthelactone (4), isosclerone (5),4,8-dihydroxy-6-methoxy-3,4-dihydro-2H-naphthalen-1-one (6), pestalotiopsone B (7) (R)-phomotone (8),5-hydroxy-7-methoxy-4,6-dimethylphthalide (9), convolvulol (10), convolvulanic acid B (11), (S)-phomotone (12)。通过对菌株YE3048的扩大发酵,以及发酵产物的提取和分离纯化,共分离鉴定了3个化合物,分别为过氧麦角甾醇(1),球毛壳菌素E(2),球毛壳菌素Vb(3),其中化合物2和3为球毛壳菌的特征次生代谢产物。
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