围食膜是昆虫中肠分泌的一层特有非细胞结构,由不含糖蛋白、糖蛋白、蛋白多糖和几丁质组成,是昆虫中肠细胞抵御随食物摄入的病原微生物入侵的第一道天然屏障。许多研究表明,几丁质酶、颗粒体病毒增强蛋白、荧光增白剂等生物或化学因子能够破坏围食膜结构的完整性,可显著的增加杆状病毒或其他病原物的感染性。所以,任何扩大围食膜孔洞,够破坏围食膜结构完整性的因素都可能提高病毒的感染性。相反,堵塞、封闭或减小围食膜的孔隙可能会得到相反的结果。基于此认识,我们用荧光增白剂解离甜菜夜蛾幼虫围食膜蛋白,制备抗体,以此研究昆虫围食膜蛋白抗体对重组杆状病毒感染性的影响。 在离体条件下,以1%荧光增白剂FB-28解离适龄甜菜夜蛾幼虫围食膜,用所制得的围食膜蛋白为抗原,选体重2～3公斤的健康雄兔进行免疫。全程注射四次,首次免疫4周后加强免疫,加强免疫每次间隔2周。每次免疫抗原剂量约150μg。首次免疫时,抗原液加等体积完全福氏佐剂,混匀乳化后,进行皮下少量多点注射而获得抗血清。再用抗血清同时加入4种蛋白酶抑制剂（0.5μg/ml Leupeptin,1μg/mlPepstatin,1mmol/l EDTA,1mmol/lPMSF）涂在昆虫饲料上喂食3¹⁶龄（三龄后16小时）及4⁰龄（四龄初）的甜菜夜蛾,在喂食0小时,2小时,4小时,6小时后,分别用浓度为1.55×10⁷PIBs/ml的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（AcMNPV-hsp70/lacZ）及含1%（终浓度）的光增白剂的混合液感染,并设对照组（即未添加光增白剂和未喂食抗体的）,进行生物测定。生物测定结果显示:以抗血清喂食3¹⁶龄幼虫后,随着接种时间的推迟,病毒对幼虫的致死率逐渐降低,而没有喂食抗血清的两组死亡率都大致分别维持在37.8%和80%左右;在对4⁰龄幼虫进行毒力测定时,随着接种时间的推迟,病毒对幼虫的致死率都逐渐降低,但喂食抗血清的两组比相应的未喂食抗血清的两组死亡率都要低。 在喂食抗体4小时后用病毒感染3龄末甜菜夜蛾幼虫其LC₅₀为6.19×10⁹PIBs/ml,而单剂感染甜菜夜蛾幼虫的LC₅₀为1.56×10⁷PIBs/ml,喂食抗体后LC₅₀提高397倍。用添加荧光增白剂FB-28的病毒感染3龄末甜菜夜蛾幼虫其LC₅₀为4.11×10⁴PIBs/ml,而在喂食抗体4小时后用添加荧光增白剂FB-28的病毒感染3龄末甜菜夜蛾幼虫其LC₅₀为1.04×10⁶PIBs/ml,喂食抗体后LC₅₀提高25倍。