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第一部分大鼠原位种植性肝癌模型的建立及其组织病理学表现目的:探究Walker/LLC-WRC 256腹水瘤株肿瘤细胞悬液经开腹直接注射法在SD大鼠肝脏内建立原位种植性肝癌模型的可行性。方法:取健康、雄性SD大鼠24只,随机抽取20只为建模组,4只为对照组。建模组:首先将0.5ml Walker/LLC-WRC 256瘤株(细胞计数约0.5×107个)注射到幼鼠的腹腔内进行保种、传代,7天后重复上述过程,连续2次保种、传代。传代后的癌性腹水经离心、浓缩后获取半液态浓缩肿瘤细胞悬液,并直接注射于大鼠肝脏左叶内,注射剂量为0.05ml(细胞计数约5×106个)。术后定期对手术切口进行消毒,防止切口感染。对照组:SD大鼠自由饮水、摄食,肝脏内未注射癌性瘤株。建模组按建模时间周期进行分组,分成5d组、6d组、7d组及8d组,每组5只,行肝脏MRI扫描,扫描结束后立即处死建模组及同期对照组大鼠,观察大鼠肝脏大体情况,肿瘤形态、大小,检查腹腔内有无转移,并行组织病理学检查。结果:建模组大鼠经大体标本观察发现共有16只大鼠成功建立原位种植性肝癌模型,共建立18个病灶,接种阳性率达80%。肿瘤结节肉眼观呈结节状或不规则形黄白色鱼肉样组织,边界较清楚,部分较大肿瘤中央可见出血坏死区。HE染色显示肿瘤细胞排列分布紊乱,大小、形态不一,核大深染,核分裂象多见,异型性显著,部分肿瘤细胞内部可见片状无细胞核的坏死区。对照组大鼠肝脏质地柔软,表面光滑、富有光泽,肝脏表面及内部均未发现肿瘤结节形成。HE染色显示肝小叶结构正常,肝细胞索排列规则、致密,并呈放射状向四周分散,肝细胞无变性、坏死,细胞核圆居中,且未出现核分裂象改变。结论:利用Walker/LLC-WRC 256瘤株直接注射法能在SD大鼠肝脏内成功建立原位种植性肝癌。第二部分铁氰化锰钾纳米对比剂在大鼠原位种植性肝癌MRI诊断中的价值目的:采用Walker/LLC-WRC 256瘤株建立大鼠原位种植性肝癌模型,探讨铁氰化锰钾纳米对比剂增强MR显像对大鼠原位种植性肝癌的诊断价值及其病理基础。方法:采用Achieva 1.5 T超导磁共振成像设备(荷兰Philips公司)及Microscopy 4.7 cm显微线圈(荷兰Philips公司)对20只建模组大鼠行MR TSE-T1WI、TSE-T2WI-SPAIR序列平扫,然后经尾静脉注射铁氰化锰钾(KMn[Fe(CN)6])纳米对比剂,对比剂浓度为45mmoI/L,注射剂量为1ml/300g体重,分别于注射完成后5min、30min、1h、2h行肝脏MR增强扫描,MR扫描完成后立即处死大鼠,并取出肝脏组织进行病理组织学检查。采用ViewForum4.1软件勾画ROI并测量每只大鼠增强前、后正常肝脏组织信号强度(SILiver)、肿瘤信号强度(SIlesion)及背景噪声信号强度的标准差(SD),利用公式计算出增强前、后各时间点正常肝组织信噪比(SNRLiver)和肿瘤组织的信噪比(SNRLesion)及相应对比噪声比的绝对值(|CNR|),分别绘制增强前、后T1WI及T2WI各时间点大鼠肝脏的SNRLiver-时间、SNRLesion-时间、|CNR|-时间的动态变化曲线。采用单因素重复测量资料的方差分析比较增强前、后T1WI及T2WI各时间点SNRLiver、SNRLesion、相应|CNR|的值是否存在统计学差异。结果:经尾静脉注入KMn[Fe(CN)6]纳米对比剂后,大鼠肝脏TIWI增强前、后各时间点 SNRLiver值分别为:71.61±33.26、96.21±46.08、105.08±44.54、94.74±44.19、90.15±40.17。SNRLesion 值分别为:52.70±26.97、52.77±26.77、53.57±26.82、52.95±26.07、53.00±26.48。|CNR|值分别为:18.91±12.44、43.44±24.51、51.51±22.39、41.79±22.66、37.15±19.16。大鼠肝内肿瘤组织TIWI增强前、后各时间点的SNRLesion值差异无统计学意义(P>0.05),大鼠肝脏TIWI增强前、后各时间点的SNRLiver值及|CNR障差异均具有高度统计学意义(P<0.01),增强后各时间点的SNRLiver值及|CNR|值与平扫比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。经尾静脉注入KMn[Fe(CN)6]纳米对比剂后,大鼠肝脏T2WI增强前、后各时间点SNRLiver值分别为:16.38±6.54、6.95±1.68、5.54±1.64、3.97±1.44、5.60±1.96。SNRLesion值分别为:34.55±15.77、34.45±15.62、34.49士 15.58、34.55±15.51、34.49±15.73。|CNR|值分别为:18.17±9.96、27.50±14.68、28.95±14.97、30.58±14.63、28.89±14.34。大鼠肝内肿瘤组织T2WI增强前、后各时间点的SNRLesion值差异无统计学意义(P>0.05),大鼠肝脏T2WI增强前、后各时间点的SNRLiver值及|CNR|值差异均具有高度统计学意义(P<0.01),增强后各时间点的SNRLiver值及|CNR|值与平扫比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。普鲁士蓝染色显示蓝染的KMn[Fe(CN)6]纳米颗粒主要聚集在肝窦区Kupffer细胞内,而肝癌病灶内未见蓝染颗粒。结论:KMn[Fe(CN)6]纳米对比剂对正常肝脏具有T1正性增强作用及T2负性增强效应,具备T1-T2双模态对比剂特性,且成像时间窗较宽。肝癌组织因不具有Kupffer细胞,于T1WI、T2WI扫描图像上信号未见明显改变,KMn[Fe(CN)6]纳米对比剂有助于肝癌的检测及定性诊断。