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牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是两种重要的牛病毒性传染病毒。两种病毒均可造成机体的免疫抑制。临床中存在BVDV与IBRV共同感染、BVDV与其它呼吸道病原混合感染或继发感染的情况。本研究在体外进行了两种病毒感染MDBK细胞后的病毒复制和凋亡研究,为研究病毒感染的分子机制和开发疫苗奠定了基础。本研究首先进行了CP型的BVDV与IBRV的增殖,然后选择0.2 MOI、1.0MOI、2.0 MOI的BVDV感染MDBK细胞,50%细胞病变时再分别感染IBRV(0.1 MOI),同时设单独感染BVDV、IBRV的对照组和空白细胞对照。共感染24h后收集细胞提取病毒核酸,采用实时荧光定量PCR和间接免疫荧光等方法进行了病毒感染、载量和细胞活性等检测,确定了MDBK细胞感染两种病毒后的病毒复制和细胞活性。应用CCK-8细胞增殖试验、TUNEL检测法、流式细胞仪等进行了病毒定位与凋亡等检测,确定病毒共感染对细胞凋亡的影响。结果表明,当BVDV 0.2MOI、1.0MOI时,IBRV的病毒拷贝数与IBRV单独感染组差异不显著。当BVDV 2.0 MOI时,IBRV病毒拷贝数明显低于IBRV单独感染组。间接免疫荧光检测显示BVDV与IBRV可以共同感染MDBK细胞并造成细胞凋亡,且随细胞感染BVDV病毒量的增加,细胞病变逐渐加剧。细胞活性检测结果显示,两个病毒共同感染后对细胞造成了较大影响,随着病毒量的增多,细胞活性降低,且共同感染组细胞活性低于单独BVDV感染组细胞活性。流式细胞仪检测感染率与凋亡率结果均表明,BVDV与IBRV共感染细胞的感染率均高于BVDV单独感染的细胞,且此试验中的BVDV对IBRV的复制有显著影响。综上所述,研究表明感染BVDV的MDBK细胞再次感染IBRV时,两个病毒均可在细胞中进行复制,但高感染复数的BVDV会加剧MDBK细胞的病变,进而影响IBRV的复制。BVDV与IBRV共同感染引起细胞活性明显降低,对细胞造成的损伤大于病毒单独感染,并造成更严重的细胞凋亡。