论文部分内容阅读
不结球白菜(Brassica campestris ssp.chienesis Makino)俗名小白菜、青菜,原产中国,主产区在长江中下游地区,在蔬菜周年供应中起着举足轻重的作用。不结球白菜为典型的异花授粉作物,杂种优势明显。不结球白菜雄性不育系克服了自交不亲和系制种的缺点,成为不结球白菜生产一代杂种的理想系统,因此,雄性不育的研究应用受到育种工作者的青睐。不结球白菜OguraCMS是不结球白菜雄性不育材料中重点研究的对象之一,Ogura不育源因其雄性不育彻底,不育度及不育株率均为100%而备受关注,但是长期以来通过Ogura不育源转育的作物,都存在转育植株苗期黄化,蜜腺发育不良的问题。江苏省农科院蔬菜所十字花科课题组从苏州市蔬菜所引进Ogura不育源,成功将其转育到不结球白菜上,经过多代选育工作,现拥有的不结球白菜OguraCMS基本上克服了植株苗期黄化,蜜腺发育不良的问题。本研究就是从不结球白菜OguraCMS的配合力和生理特性两方面进行研究分析,为进一步在育种中的广泛应用提供理论依据,另外又对不育基因进行ISSR分子标记,不仅是为了开发一种标记,而且也期望为探索Ogura不育机理研究提供理论。结果如下:1、配合力和遗传力分析的结果表明:株高、叶宽、叶柄长、叶柄宽主要受基因加性效应的影响,株幅、叶长和小区产量主要受基因加性效应和非加性效应的共同影响,一般配合力表明,母本应选苏州青CMS和夏王保持系,父本则选引05、水月油菜和宁矮青,按照特殊配合力效应值的大小可以把矮淡保持系×宁矮青、矮淡保持系×水月油菜、夏王CMS×引05、夏王保持系×水月油菜、夏王保持系×宁矮青、苏州青CMS×水月油菜、苏州青×青引0703作为优良的杂交组合。2、低温胁迫下生化指标的分析结果表明:不育系的叶绿素、可溶性糖、可溶性蛋白质和脯氨酸含量在处理的各阶段均低于其保持系,SOD、POD和CAT活性则是不育系高于其保持系。随着低温时间延长,不育系和保持系的叶绿素和可溶性蛋白质的含量一直下降,可溶性糖和脯氨酸含量呈现先上升后下降的趋势;SOD、POD和CAT活性呈现先上升后下降的趋势。不育系和保持系在处理的各个阶段变化的一致性和处理后各生化指标数值差异缩小,表明不结球白菜OguCMS在苗期遇低温的抗逆能力有了大的提高。3. ISSR分子标记优化的结果:在20u1反应体系中,DNA浓度为40ng, Mg2+的浓度为2.5mmol/L, dNTP浓度为0.2mmol/L,引物浓度为0.5mmol/L, Tag酶浓度为1.0U. PCR扩增程序为:94℃预变性5min,94℃变性lmin,53℃退火45s,72℃延伸1.5min,35个循环;72℃延伸10min。这一体系的建立为今后利用技术进行不结球白菜种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。不育基因ISSR分析标记的结果:在75条ISSR引物中筛选出引物U043,经过多次重复发现它能在不育系和保持系中扩增出稳定的特异条带,并经过检验在四个杂交世代中扩增出那条稳定的特异条带