色谱填料的发展始终是色谱技术发展的核心,无孔硅胶填料可用于生物大分子的快速分离分析,由于这类颗粒表面无孔,消除了溶质在固定相上的滞留流动,因而分离速率明显加快;但它的不足之处在于柱容量较小。全多孔硅胶微球发展最大的瓶颈在于粒径分布较宽,而利用筛分技术并不能得到粒径分布很窄的全多孔硅胶微球。核壳硅胶填料具有无孔实心核和较浅的孔道结构,使得颗粒内部的扩散距离缩短、传质阻力降低、分离速度加快,而且避免了小粒径填料柱压过大的问题,在超高效液相色谱中得到了广泛应用。针对目前核壳微球在制备和色谱应用方面存在的问题,本论文中发展了一种硬模板法合成了纳米核壳型硅胶微球的方法,微球粒径为160-340 nm,壳层厚度为25-83 nm。其中壳层制备步骤仅需要一步反应,利用该方法制备出的微球具有自中心向外发散的孔道结构,并将其成功应用在糖肽的富集。针对目前常用的亲水作用色谱材料在糖肽富集时出现特异性差、灵敏度低的问题,我们采用光照引发的巯基–烯点击聚合反应制备了谷胱甘肽功能化的纳米核壳硅胶微球。该亲水性纳米核壳硅胶微球对IgG胰蛋白酶解液中糖肽检测限为700 fmol,吸附量最大限度为35μg IgG。进一步将该亲水性固定相应用于富集复杂肽段混合物中的糖肽,结果表明它对糖肽类物质富集具有较高的选择性。此外,本研究着力探索制备微米级核壳硅胶微球的有效方法,以满足日益增长的生物医药大分子高效液相色谱分离分析的需求。本论文采用硬模板法将酚醛树脂和硅源包覆在以无孔硅胶为核的表面,并经过后续烧结和扩孔等步骤后得到最终的微米级核壳硅胶微球。目前实验还在制备优化过程,有望应用于生物分析和催化等领域。