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目的:通过观察普通水透析及改用超纯水透析后患者血清白细胞介素6(IL-6)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)及白蛋白(ALB)的变化,以及普通水透析及超纯水透析单次透析前后上述指标的变化,探讨超纯水透析对维持性血液透析患者微炎症状态的影响及影响机制,为临床治疗提供理论依据。
方法:选取2006年10月至2009年10月在河北医科大学第四医院血液净化中心住院治疗并行维持性血液透析的患者18例。采用序贯疗法(普通透析用水透析12个月,超纯水透析24个月)进行为期3年的研究。其中男性13例,女性5例,平均年龄(57.92±18.2岁),慢性肾小球肾炎6例,糖尿病肾病4例,多囊肾2例,其他病因6例。均使用自体动静脉内瘘,碳酸氢盐透析液,选用可复用透析器(三醋酸纤维素膜透析器CT-190G、双醋酸纤维素膜透析器CA-HP150),美国MINNTECH透析器复用机,严格按国家透析器复用标准复用。透析液流量为500ml/min,血流量为220~250ml/min,透析机为Fresenius4008S,低分子肝素钠抗凝剂(齐征)抗凝。每周透析2~3次,每次透析时间为4~4.5小时,尿素清除指数(Kt/V)>1.2。所有观察对象病情稳定,除外合并细菌感染或病毒感染,无其他活动性免疫性疾病,整个观察期间未接受血液制品(血浆、蛋白)输注,未接受抗氧化剂(包括维生素C、维生素E)治疗,未接受激素或免疫抑制剂治疗,未接受静脉铁剂治疗,无手术、外伤情况,无严重肝脏疾病及肿瘤,所有患者均未服用ACEI类药物6个月以上。普通透析用水透析治疗12月后改超纯水透析,除透析用水改变外,透析治疗剂量和治疗方式均无改变。分别抽取18例观察对象普通透析用水透析前及12月时,改用超纯水透析前、12月及24月时透析前后血标本,每次抽血4ml,以上标本均离心后取血清置于-80℃冰箱保存待检。检测IL-6、MDA含量及MPO活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性及血浆白蛋白(ALB)浓度。分别对普通水水样及超纯水水样进行内毒素检测及细菌培养,内毒素检测采用鲎氏动态比浊法,细菌培养采用倾注平板法。内毒素检测结果及细菌培养结果均符合2004年AAMI关于普通透析用水及超纯水的微生物学界定标准。血清IL-6采用双抗体夹心ELISA法,MDA测定采用硫代巴比妥酸反应法,MPO活性测定采用分光光度比色法,SOD活性测定采用黄嘌呤氧化酶法,ALB测定采用溴甲酚绿比色法。比较18例观察对象行普通水透析0-12月及改用超纯水透析0-12月血清IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB水平的变化,同时比较普通水透析及超纯水透析单次透析前后上述指标的变化,动态观察18例观察对象改用超纯水透析前、12个月及24个月时IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB水平的变化。所有数据均以均数±标准差((-x)±s)表示,符合正态性及方差齐性检验的数据,自身前后变化比较用配对T检验,不符合方差齐性检验或正态性检验,自身前后变化比较用配对样本比较的Wilcoxon符号秩检验。重复测量数据应用重复测量设计资料的方差分析,若Mauchly球形检验结果P<0.05,则需对自由度进行Greenhouse-Geisserε校正,重复测量配对T检验应用Bonferroni法。P<0.05认为统计学差异有显著性。采用SPSS11.0统计软件包对数据进行分析。
结果:
1普通水和超纯水微生物含量比较
超纯水细菌菌落数和内毒素含量均明显低于普通透析用水(P<0.01)。
2普通透析用水透析治疗对血清IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB水平的影响
治疗前患者血清IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB值分别为(74.21±+30.88)pg/ml、(10.94±4.12)nmol/ml、(395.28±148.2)u/L、(99.01±17.94)u/ml、(30.25±5.34)g/L;治疗12月后血清IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB值分别为(76.64±28.24pg/ml、(13.36±3.98)nmol/ml、(419.53±141.17)u/L、(106.13±12.90)u/ml、(32.05±2.88)g/L)。治疗后血清IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB水平与治疗前相比,各项指标差异均无显著性(P>0.05)。
3超纯水透析不同时间点对血清IL-6、MDA、MPO、SOD及ALB的影响
超纯水透析治疗前血清IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB分别为(76.64±28.24)pg/ml、(13.36±3.98)nmol/ml、(419.53±141.17)u/L、(106.13±12.19)u/ml、(32.05±2.88)g/L;治疗12月时血清IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB值分别为(42.15±21.23)pg/ml、(11.26±1.76)nmol/ml、(268.21±99.03)u/L、(112.15±10.79)u/ml、(37.39±2.75)gm),治疗24月时血清IL-6、MDA、MPO、SOD、ALB、值分别为(22.33±11.17)pg/ml、(1.96±0.50)nmol/ml、(106.56±23.29)u/L、(92.41±19.27)u/ml、(41.55±4.18)g/L。
重复测量两时间点的两两比较显示:超纯水透析12个月时,IL-6、MDA、MPO较改水前下降,差异有显著性(P<0.01,P<0.05,P<0.01),ALB显著上升(P<0.05),SOD无显著性差异(P<0.05);超纯水透析24个月时,IL-6、MPO、MDA较改水前下降,差异有显著性(P<0.01),ALB显著上升(P<0.01),SOD无显著性差异(P>0.05);超纯水透析24个月与透析12月比较,IL-6、MDA、MPO水平显著下降,差异有显著性(P<0.01),ALB显著上升,差异有显著性(P<0.01)。SOD无显著性差异(P>0.05)。
对改用超纯水前、超纯水后12个月、24个月数据采用重复测量方差分析显示:改用超纯水后的透析时间是影响IL-6、MDA、MPO、ALB水平的一个因素(P<0.05),对SOD的影响无显著性差异((P>0.05))。
4单次透析前后血清IL-6、MDA、MPO、SOD的变化
采用普通透析用水,单次透析前血清IL-6、MDA、MPO、SOD分别为(74.21±30.88)pg/ml、(13.94±4.12)nmol/ml、(316.224±58.24)u/L、(99.01±17.94)u/ml,透析后血清IL-6、MDA、MPO、SOD分别为(23.04±11.92)pg/ml、(15.39±4.06)nmol/ml、(293.41±50.68)u/L、(92.57±17.88)u/ml。
采用超纯水透析,单次透析前血清IL-6、MDA、MPO、SOD分别是(38.17±13.23)pg/ml、(1.96±0.50)nmol/ml、(214.32±22.78)u/L、(92.41±19.27)u/ml,透析后血清IL-6、MDA、MPO、SOD分别为(22.33±11.17)pg/ml、(1.90±0.92)nmol/ml、(200.5±17.08)u/L、(99.19±13.44)u/ml。
结果显示,普通水透析及超纯水透析单次透析前后血清IL-6水平变化明显,单次透析后IL-6水平明显低于透析前,差异有显著性(p<0.01);MDA、MPO、SOD均无明显变化,差异无显著性(P>0.05)。
结论:
1透析用水中内毒素和细菌含量是影响透析患者微炎症状态及氧化应激水平的主要因素,微炎症状态及氧化应激之间是协同作用。
2超纯水透析能够改善透析患者的微炎症状态,且随着超纯水透析时间的延长有持续改善作用。
3超纯水透析对微炎症状态的改善作用并非通过对炎性介质及氧化应激产物的直接清除作用实现的。