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人Ndrg2基因（N-myc downstream regulated gene 2）是1999年从正常成人全脑文库中最先发现并克隆得到。其染色体定位于14q11.2，含有16个外显子，15个内含子，mRNA全长为2，024bp，编码含有357个氨基酸残基，分子量约40KD蛋白质。Ndrg基因家族中最先被发现的是Ndrg1，是在研究N-myc下游调节基因时从小鼠胚胎中发现的，现已发现的人Ndrg基因家族成员有4个：Ndrg1，Ndrg2，Ndrg3和Ndrg4，它们之间具有较高的同源性，但其表达水平在组织发育阶段和分布上存在明显差异。目前对Ndrg基因家族功能了解主要来源于Ndrg1的研究，已发现上调Ndrg1的因素有：同型半胱氨酸、细胞氧化应激反应(缺氧，Ni2+，各种还原剂)、视黄酸、p53等。综合已有文献，推测Ndrg基因家族可能参与细胞生长分化，维持细胞氧化还原电势平衡，阻止肿瘤细胞恶化等。 前期研究工作表明，Ndrg2基因在多种组织中均有表达，而以中枢神经系统的大脑皮质、白质、神经核，唾液腺上皮细胞和骨骼肌细胞中表达最高，在多种肿瘤组织或细胞系如结肠癌、胶质瘤、白血病、淋巴瘤和腮腺癌中无表达或低表达，相反，在上述肿瘤相应的正常组织细胞中有较高水平的表达，弟p罩厦大学傅士学馒铂文 甲文扫翼4因此推测川灯牡基因可能是一新的抑癌基因，故研究Ndrf基因功能及其调节具有重要的理论意义及临床应用价值，而目前尚未见有相关的研究报道。本研究旨在探讨Nd基因在原发性肝细胞肝癌发病机制中的作用，确定其功能，为肝癌的防治提供理论依据。本研究的主要发现如下：1．采用半定量RT－PCR方法检测了Nd基因在原发性肝细胞肝癌中的表达， 发现其表达水平显著低于相应癌旁的正常肝组织，提示NdrM基因可能参 与了肝癌的发生发展过程，进一步分析发现其表达与肝癌Ed。ondson病理 分级、核DNA倍体之间并无明显相关性。2．兔疫组化证实Nd蛋白表达在细胞胞浆。3．成功构建了正义尸IRE：52 dGTPv7太萨绿色荧光蛋白表达载体和反义 尸，xe：ss＆crerank 载体，并筛选出Msr表达阴性ne灿z细胞系。4．将正义 PlAT：SZ－－EtwdrgZ质粒瞬时转染 HePGZ细胞，Ndrf基因在 48h 得到表达，并出现转染细胞生长增殖受抑，GI期阻滞，凋亡峰出现；将反 义尸ILZ：52edUfPrantimdnd质粒瞬时转染于 QZG细胞，同对照相比，转 染细胞在细胞形态及细胞周期等方面无明显变化。5．将正义厂IAZ：52 dUf77－－太牡稳定转染细胞，药物筛选后得到稳定表达 川大牡基因的HepGZ细胞，其在生长性、克隆形成、成瘤性方面显著低于 未转染的HeeGZ细胞，提示Ndrl具有抑制肿瘤细胞恶性生长功能，并主 要在已发生恶性转化的细胞起作用。 总之，本研究工作所揭示的川办萨基因在原发性肝细胞肝癌组织中的表达及其功能的初步研究，为明确该基因功能，并对进一步揭示肝癌的发病机制及开展基因治疗，提供了理论依据。