肝脏是体内主要的解毒器官,药物性急性肝损伤在近年来发病率逐渐增加,但治疗手段和药物均较少。本文通过正交方法优化茵梔解毒颗粒筛选出治疗药物性急性肝损伤的中药制剂-茵黄口服液。首先使用正交方法优化药物性急性肝损伤模型。以给药剂量、中毒途径和采血时间三个条件进行正交设计,并对性别条件进行分析。优选以800 mg/kg APAP腹腔注射雄鼠,28 h时后采血检测可以制作出最佳的大鼠药物性肝损伤模型。在上述基础上使用正交方法对茵栀解毒颗粒进行药方筛选。每组大鼠在造模12 h、24 h、36 h后,以20g/kg灌服药物三次,48 h后采血。以药效学为评价指标,得到茵陈:黄芩(2:1)的茵黄口服液。探索茵黄口服液的最佳煎煮条件。以浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数和药液比四个因素,每个因素选择合适的三个水平进行正交试验,得到茵黄口服液在浸泡1h、药液比为1:10、煎煮3次每次2 h为最佳的煎煮条件。同时建立茵黄口服液的质量检测标准。通过TLC对茵黄口服液中的茵陈和黄芩进行定性鉴别;采用HPLC法对君药茵陈进行定量检测。结果显示,两味中药的供试品色谱中,与中药对照药材和对照品色谱相应位置上均出现了相同颜色的斑点,阴性对溶液无干扰,方法可行,专属性、重复性好。使用HPLC测定茵陈中绿原酸的含量。色谱条件为:C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm):流动相:乙腈-0.05%磷酸(10:90);检测波长为327 nm;流速1 mL/min;柱温40℃。线性范围考察:y=66212x-380186,R2=0.9994。线性范围:0.25μg～8μg。精密度RSD为1.89%,稳定性为1.07%,重复性为1.19%,加样回收率100.39%,RSD为3.09%,均符合质量检测要求。对茵黄口服液进行药效学研究。检测血液生化和观察肝脏组织病理切片,结果得出茵黄口服液在给药剂量20 g/kg和15 g/kg时,对药物性急性肝损伤起到良好的治疗作用。对茵黄口服液进行安全药理学研究。使用MC4000小鼠无创血压仪和EMKA小动物无创肺功能仪来检测茵黄口服液对小鼠心血管系统和呼吸系统的影响,通过对小鼠进行戊巴比妥钠阈剂量和阈下剂量的催眠试验、小鼠自主活动试验和小鼠机能协调运动试验,说明药物对神经系统的影响。发现茵黄口服液有一定的降压和镇静作用,对呼吸系统无影响。对茵黄口服液进行毒理学研究(包括急性毒性试验和长期毒性试验)。急性毒性试验结果显示茵黄口服液的LD50大于5000mg/kg,实际无毒。长期毒性试验,各剂量组与对照组相比较,各项指标(大鼠体重、饮水量、采食量、血液学和生化指标)均在正常范围内,少出现显著性差异,组织切片观察未发现任何病变。为茵黄口服液靶动物临床试验和靶动物安全药理学研究提供理论基础,测量和计算鸡的体表面积系数。将鸡皮完整剖下,放入扫描机扫描,运用Photoshop对鸡皮表面积进行测算。根据鸡的体重和体表面积,计算出鸡在Meeh-Ruhuer氏公式的K值为9.24±1.03 mg/kg-mg/m2,转移因子为10.00±1.36,单位体质量上表面积的相对比值为0.30±0.044。最后,为临床试验制作鸡急性药物性肝损伤模型。使用恩诺沙星(100-200 mg/kg)连续灌胃5天,得到稳定有效的鸡药物性急性肝损伤模型。综上所述,本课题筛选出治疗药物性肝损伤中药组方:茵黄口服液,安全有效,质量可控,并且为临床应用做了初步的探索。