可培养微囊藻附生菌的多样性与特性

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为了研究群体和单细胞微囊藻附生菌的组成和特性,并探讨附生菌在微囊藻由群体变成单细胞过程中是否发挥作用,本实验从惠氏微囊藻(NJ-24)、水华微囊藻(NJ-159、NJ-72)、铜绿微囊藻(NJ-177)、坚实微囊藻(NJ-54)的群体和单细胞藻株的培养液中共分离出28种附生菌。通过对16S rDNA片段的扩增和测序,这28种菌分别隶属于α-变形菌纲(Alpha proteobacterium)、β-变形菌纲(Beta proteobacterium)、γ-变形菌纲(Gamma proteobacterium)、放线菌纲(Actinobacteria)、纤维粘网菌纲(Cytophagia)、杆菌纲(Bacilli)、黄杆菌纲(Flavobaeteriia)。其中43%的细菌属于α-变形菌纲,21%属于放线菌纲,11%分别属于纤维粘网菌纲和γ-变形菌纲。在分离的所有附生菌中,变形菌纲的菌种占的比例最高,高达55%,其次是放线菌纲,而属于杆菌纲和β-变形菌纲的细菌最少。在这28种附生菌中,有4种细菌只在单细胞藻中出现,12种细菌只在群体藻中出现,余下的12种细菌既存在于单细胞藻液中又存在于群体藻液中,且这些菌在藻液中出现的比例没有一定的规律。  通过BIOLOG ECO板分析显示,这28种细菌中,有17种细菌利用碳源的种类达到20种及以上,其中7种细菌属于α-变形菌纲,4种细菌属于放线菌纲,3种细菌属于纤维粘网菌纲,β-变形菌纲、γ-变形菌纲、黄杆菌纲的细菌各一株,这些能利用较多碳源的细菌既存在于群体藻中也存在于单细胞藻中。通过MATH法分析显示,有10种细菌的疏水性较大,其中4种细菌54D-3(Rhodobacter sp.)、54D-4(Staphylococcus caprae)、177Q-1(Sphigomonas sp.)、177Q-6(Aeromicrobiumsp.)的疏水性高达70%以上。从趋化性分析看,有6种细菌的趋化性较强,趋化直径达到了20mm以上,且这些细菌既有从群体中分离的,也有从单细胞藻中分离的。从细菌的自聚实验和细菌与其它菌的共聚实验也可以看出,有8种细菌的自聚能力很强,但这些细菌与其它细菌的共聚反应不强,而那些能发生较强共聚反应的细菌的自聚能力不强,说明细菌的自聚性与细菌的共聚性无明显的相关性;从群体中分离出的细菌之间的共聚集特性与从单细胞中分离出的细菌之间的共聚特性并无明显差异,而且能发生自聚和共聚现象的细菌在藻液中出现的比例也没有明显的规律。说明附生细菌之间的共聚集与微囊藻群体的形成没有相关性。这28种细菌都能在各自的群体藻提取液、单细胞藻提取液中生长,其中有5种既存在于群体藻又存在于单细胞藻中的细菌在藻提取液中的生长量△OD600达到了0.1以上,而这5种细菌在藻中出现的比例却不是很高,说明这些菌对于群体藻提取液、单细胞藻提取液的利用情况无明显差别。  通过对微囊藻的群体藻附生菌与单细胞藻附生菌的组成的分析以及对这些附生菌的碳源的利用、疏水性、趋化性、自聚、共聚以及藻提取液对细菌生长的影响的研究,发现群体藻附生菌与单细胞藻附生菌的组成以及特性无明显差异,说明这些附生菌的组成以及特性与藻由群体变成单并无明显的相关性。
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