【摘 要】
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一大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNA的相互作用.用化学法分段合居的tRNA和tRNA的基因分别连接到pTrc99B质粒上,在大肠杆菌MT102中高表达.经DEAE-Sepharose、BD-纤维素层析术,
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学
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一大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶与tRNA的相互作用.用化学法分段合居的tRNA<,1Leu>和tRNA<,2Leu>的基因分别连接到pTrc99B质粒上,在大肠杆菌MT102中高表达.经DEAE-Sepharose、BD-纤维素层析术,可方便地分另将其经子总tRNA中的tRNA纯化,并测得了两种等受体tRNA<,Leu>的氨酰化反应动力学常数.在大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶的 催化下,两种经体外转录产生的未修饰等受体tRNA(tRNA<,1Leu>tRNA<,2Leu>)的亮氨酸接受能力基本相同,但只有从体内纯化对应的tRNA的四分之一左右,表明修饰核苷酸在tRNA氨酰化过程中起着较为重要但非关键的作用.
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