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胃癌是常见恶性肿瘤之一,有文献报道,其死亡率居恶性肿瘤的第一或第二位,而胃癌的浸润与转移是其主要的致死原因。因此,研究胃癌的浸润与转移的机制已成为胃癌研究的热点。本课题组前期研究发现:TGF-β1在胃癌的浸润与转移中发挥了极其重要的作用。本实验拟应用SELDI-TOF-MS技术对比分析经TGF-β1作用于体外培养的胃癌细胞(BGC823、MKN45、SGC7901)后的培养液内的分泌蛋白谱在作用前后有何差异性,以探讨TGF-β1在胃癌浸润转移中的作用、机制。目前应用SELDI-TOF-MS技术研究TGF-β1刺激后的胃癌细胞分泌蛋白的对比研究在国内外还鲜有报道。目的:应用SELDI-TOF-MS技术对比分析胃癌细胞经TGF-β1刺激前后的分泌蛋白质谱的变化,为下一步筛选有意义的差异蛋白奠定理论和实验基础。方法:以胃癌细胞SGC7901、BGC823、MKN45细胞为研究对象。1.体外传代培养胃癌细胞SGC7901、BGC823和MKN45,分析其培养液中分泌蛋白质谱的变化。2.将体外传代培养的胃癌细胞(BGC823、MKN45、SGC7901)分为实验组和对照组。实验组加入TGF-β1刺激,而对照组不加入TGF-β1刺激。培养24h后收集细胞培养液并离心,与WCX2蛋白芯片杂交后,上机进行SELDI-TOF-MS检测。结果:1.得到了WCX2蛋白芯片上BGC823,MKN45,SGC7901细胞株的分泌蛋白质图谱:①胃癌细胞BGC823受TGF-β1刺激后,发现了13个差异蛋白峰,质荷比M/Z分别是M4294,M4932,M4945,M4972,M4991,M5015,M5036,M5060,M5153,M5180,M5197,M8577,M8784。②胃癌细胞MKN45受TGF-β1刺激后,发现了18个差异蛋白峰,M/Z分别是M4292,M4931,M4945,M4972,M4990,M5014,M5152,M5178,M7055,M8190,M8570,M8652,M8670,M8780,M9963,M10098,M10523,M11653。③胃癌细胞SGC7901受TGF-β1刺激后,发现了8个有意义的差异蛋白峰,M/Z分别是M4945,M4972,M4992,M5015,M5180,M7056,M8573,M8604。2.比较三种胃癌细胞经TGF-β1刺激前后的蛋白质图谱,共发现2个有意义的共同差异蛋白峰,它们的质荷比分别是M4945,M4972。3.BGC823,MKN45,SGC7901细胞株分泌蛋白质之间存在稳定的蛋白质表达差异,提示不同分化程度的胃癌细胞之让分泌蛋白可能存在蛋白质数量及蛋白修饰方面的差异。结论:筛选出与TGF-β1作用相关的胃癌特征性的生物标记物—M4945,M4972,这些生物标记有可能应用于对胃癌患者浸润、转移的早期预测和临床诊断。