铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛与碘伏抗性及其机制研究

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【目的】探讨铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛与碘伏抗性及其机制;探讨铜绿假单胞菌抗生素耐药与消毒剂抗性的关联。【方法】1.实验方法以铜绿假单胞菌标准菌株ATCC15442为实验菌进行中和剂鉴定试验;以临床收集铜绿假单胞菌为实验菌,进行最小抑菌浓度MIC测定、最小杀菌浓度MBC测定、悬液定量杀灭试验与连续消毒试验;运用PCR与质粒抽提检测qacE-sul1基因。2.统计方法采用SPSS11.5,MIC值与MBC值结果进行卡方检验、秩和检验,悬液定量杀灭试验结果进行重复测量方差分析。【结果】1.铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛与碘伏的抗性MIC值判定铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛抗性率为60%,对碘伏抗性率为20%;作用1min的MBC值判定铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛抗性率为41%,对碘伏抗性率为28%;400mg/L邻苯二甲醛作用1min的杀灭对数值判定抗性率为60%,作用3min的杀灭对数值判定抗性率为34%;80mg/L碘伏作用1min的杀灭对数值判定抗性率为51%,作用3min的杀灭对数值判定抗性率为32%;并联试验方法判定,铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛抗性率为89%,对碘伏抗性率为60%;串联试验方法判定,铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛抗性率为10%,对碘伏抗性率为11%。2.铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛与碘伏抗性的变化趋势连续分离的铜绿假单胞菌随着分离次数增多从没有抗性到具有抗性,从对单一消毒剂抗性到对两种消毒剂抗性,并且抗性逐渐增强。连续消毒的铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛与碘伏的抗性均增强。3.qacE-sul1基因检测qacE-sul1基因阳性率为19%,均存在于质粒DNA上。PCR产物测序为261bp,并在GenBank中注册序列号:FJ687220。邻苯二甲醛与碘伏对qacE-sul1基因阳性与阴性铜绿假单胞菌的杀灭效果没有差别,抗性与非抗性铜绿假单胞菌的qacE-sul1基因阳性率没有差别。4.铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛与碘伏抗性与抗生素耐药的关联邻苯二甲醛与碘伏对抗生素耐药与敏感铜绿假单胞菌的MIC值、MBC值与杀灭对数值没有差别。【结论】铜绿假单胞菌对消毒剂抗性严重,对邻苯二甲醛抗性的铜绿假单胞菌对碘伏未必具有抗性,反之亦然。铜绿假单胞菌消毒剂抗性的产生与低浓度消毒剂长期使用有关。未观察到铜绿假单胞菌qacE-sul1基因携带与邻苯二甲醛与碘伏抗性之间的关联。未观察到铜绿假单胞菌对邻苯二甲醛与碘伏抗性与抗生素耐药相关。
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