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目的探讨吡非尼酮抑制肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)诱导的结肠癌HT29细胞系侵袭、迁移、增殖、上皮-间质转化(EMT)中的作用及机制。方法首先用CCK-8实验筛选吡非尼酮合适的药物浓度;利用共培养小室将CAFs与HT29共培养后CCK-8测定HT29增殖效率;在以下四种条件下培养结肠癌细胞系HT29:含10%FBS的DMEM标准培养基培养(control),含0.5mg/ml吡非尼酮培养基培养(PFD-CM),CAFs上清培养(CAF-CM),加入吡非尼酮(PFD)处理CAFs细胞后培养(PFD-CAF-CM);Real time-PCR和Western blot检测各实验组HT29结肠癌细胞E-cadherin和Vimentin转录及蛋白表达水平;Transwell实验检测各实验组HT29结肠癌细胞的迁移和侵袭能力。ELISA技术检测CAFs细胞上清液中细胞因子的表达。结果1.CCK-8结果显示PFD浓度为0.25mg/ml、0.5mg/ml均对HT29细胞增殖无抑制作用(P>0.05),选取0.5mg/ml作为PFD-CAF-CM组药物浓度;吡非尼酮抑制CAFs对HT29的增殖促进作用(P<0.05);2.CAFs上清培养基培养HT29后,Vimentin表达水平显著升高(P<0.05),E-cadherin显著降低(P<0.05);吡非尼酮处理CAFs的培养基对HT29细胞中两种蛋白无明显影响;3.Transwell实验表明CAFs与HT29共培养后,其侵袭和迁移能力明显增强(P<0.05);4.ELISA结果提示CAFs分泌TGF-β1功能受吡非尼酮抑制且存在剂量关系。结论肿瘤相关成纤维细胞可以诱导结肠癌细胞系HT29上皮-间质转化,增强其侵袭、迁移能力;吡非尼酮通过抑制肿瘤相关成纤维细胞分泌TGF-β1,抑制CAFs诱导结肠癌细胞系HT29侵袭、迁移、增殖、上皮-间质转化。