[实验目的]应用RNA干扰技术特异性沉默人脑胶质瘤U251细胞株PTTG基因,观察对人脑胶质瘤U251细胞株体外增殖、细胞周期、凋亡和侵袭性及的影响;并探索以PTTG为分子靶点,应用RNA干扰技术治疗人脑胶质瘤的可行性。[方法]已合成的特异性干扰PTTG的小分子干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)片段与pGenesil2载体连接,将已经构建完成的PTTG干扰载体(pGenesil2-PTTG siRNA),利用脂质体(Lipo2000)将其转染至U251细胞,分为正常对照组、含无效序列的Lipo2000+HK阴性对照组和Lipo2000+pGenesil2- PTTG siRNA干扰组。以MTT法观察转染后24 h、48 h和72 h各组细胞增殖的变化;流式细胞术和PI单染观察转染后48 h各组细胞凋亡和细胞周期的变化。侵袭实验分析转染后肿瘤细胞侵袭性变化。划痕实验分析转染后细胞迁移能力的影响。[结果]转染pGenesil2-PTTG siRNA至U251细胞株后,阻滞U251细胞由G1期进入S期,明显抑制了神经胶质瘤细胞的生长及增殖;细胞凋亡率明显增高;肿瘤细胞的侵袭性及迁移能力明显降低。[结论]实验采用脂质体转染的RNA干扰技术,靶向人脑神经胶质瘤U251细胞垂体肿瘤转化基因(PTTG),并观测到其对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡和迁移作用的影响,一方面证实RNA干扰技术是抑制神经胶质瘤的有效方法;另一方面表明PTTG在胶质瘤细胞生长、增殖、凋亡和迁移中起着重要的调控作用,是神经胶质瘤基因治疗的潜在靶点。