牛GPAM基因遗传多态性分析及基因沉默对脂代谢的影响

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西门塔尔牛在世界各国都有饲养,其品种分为乳用、肉用、乳肉兼用等类型。中国的西门塔尔牛是我国从瑞士引进后经过几代的杂交改良,现已成为我国一种大型的乳肉兼用牛的优良品种。线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)参与催化三酰基甘油和磷脂生物合成过程的第一步反应,从而对甘油三酯进行调控。GPAM能够促进动物机体甘油三酯的生成,并通过中心和外周调节作用,对哺乳动物能量消耗、脂肪沉积、胴体质量以及整体的代谢进行调控。为揭示GPAM基因外显子多态性与西门塔尔牛(草原型)胴体组成和肉质性状的相关性,本研究采用DNA池测序及PCR-RFLP的方法检测了245头34月龄中国西门塔牛群体该基因外显子中SNP位点的多态性,并与中国西门塔尔牛群体的胴体组成、肉质性状进行了相关性分析。结果表明:GPAM基因中基因型(CC、TC)的E20-2823C>T表现出较高的净骨重、胴体产肉率、胴体胸深、前蹄重、后蹄重(单蹄)、皮重、生殖器脂肪重、肾脏脂肪重(p<0.05);E20-3386G>A基因型(AA和GA)表现出较高的净骨重、肉骨比、大理石花纹、肾脏脂肪重(p<0.05)。本研究同时也通过脂质体介导牛GPAM基因的RNA干扰载体,沉默内源性GPAM基因在牛胎儿成纤维细胞及牛前体脂肪细胞中的表达,以期验证GPAM基因对脂代谢的影响。实验结果表明:抑制GPAM表达后显著降低牛前体脂肪细胞和牛胎儿成纤维细胞中的甘油三酯(TAG)含量,结果证明GPAM基因可能在调节动物脂肪代谢中起关键作用。
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