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目的:明确雌激素对L型钙通道电流的调控作用以及对L型钙通道蛋白水平的影响。方法:1.将新生Sprague-Dawley(SD)大鼠皮层神经元培养,定期倒置显微镜观察细胞形态及走形,第7天行免疫荧光神经元鉴定。2.以新生大鼠原代皮层神经元为研究对象,培养至7天左右时给予干预,实验设溶剂对照组及雌激素E2(1umol/L)组,干预72小时后采用全细胞膜片钳技术测定L型钙通道电流。3.培养至第7天左右神经元给予干预,实验设溶剂对照组、雌激素受体拮抗剂ICI182780(简称ICI,100nmol/L)组、雌激素E2(1umol/L)组及雌激素E2(1umol/L)加雌激素拮抗剂ICI182780(100nmol/L)组,干预72小时后提取细胞蛋白用蛋白免疫印记Western blot方法检测神经元总Cav1.2量的变化。结果:1、培养第7天的细胞胞体饱满,折光性强,走形良好,轴突密集形成网状结构,免疫荧光结果显示大部分细胞MAP-2染色阳性(红染),为神经元细胞,形态良好。2.全细胞膜片钳结果显示雌激素处理组L型钙通道电流较对照组神经元电流明显减少(P<0.05),3.蛋白免疫印迹Westernblot结果提示雌激素处理后Cav1.2的量明显减少(P<0.01),正常组与雌激素受体拮抗剂ICI、雌激素加ICI组无明显差异(P>0.05)。结论:1.原代皮层神经元细胞培养成功。2.雌激素处理可以减少神经元L型钙通道电流。3.雌激素处理减少了原代皮层神经元LTCC蛋白Cav1.2