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目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)过继免疫疗法对治疗肺癌临床疗效的评估。方法:选取2013年11月~2015年2月河北省沧州中西医结合医院肿瘤内科、肿瘤外科住院患者27例,其中男性18例,女性9例。所有患者均经病理确诊为肺癌,最近未进行放、化疗,小细胞肺癌15例,非小细胞肺癌12例,按WHO分类标准分型。并根据患者性别、年龄、病理类型,选择同期进行最佳支持治疗的11例肺癌患者作为对照组,治疗组与对照组基线水平具有可比性。采集肺癌患者外周血单个核细胞,体外用多种细胞因子刺激获得CIK细胞,动态监测培养过程中CIK细胞的增殖活性和细胞表型变化;用流式细胞仪动态监测CIK细胞回输治疗前后患者外周血T淋巴细胞亚群的比例、Th1/Th2型细胞因子、Treg细胞和NK细胞数量的变化;采用罗氏全自动化学发光分析仪监测治疗前后患者外周血肿瘤标志物胃泌素释放肽前体(PRO-GRP)、非小细胞肺癌相关抗原(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的变化;观察CIK细胞治疗后,患者的临床症状、毒副反应及患者自身免疫功能的改变。结果:1治疗组肺癌患者自体CIK细胞比培养前有明显增高,在培养的第4 d开始快速增殖,13~19 d可达到高峰,培养后的CIK细胞总数可达(5.10~8.98)×107/ml(平均值为6.61×107/ml)。CD3+CD56+T细胞等在2周后获得大量增殖,增值比例由1.15±0.55%上升为32.25±5.01%。2治疗组患者在CIK细胞治疗后2周,外周血中CD3+、CD4+T细胞、CD4+/CD8+比值相对于治疗前有所增高,于治疗后4周左右达高峰(P<0.01),此后逐渐减低,但指标仍然高于对照组(P<0.05),与对照组相比具有统计学差异。治疗前CD3+T细胞为44.11±5.12%,于第4周达到72.31±7.11%,在8周降低至55.12±5.12%。治疗前CD4+T细胞为24.13±5.13%,治疗后有所上升,于第4周达到41.23±6.55%,在8周降低至27.71±6.95%。CD4+CD8+T细胞在治疗前为1.03±0.25%,治疗后第4周达到1.99±0.29%,之后逐渐降低,于第8周达到1.35±0.33%。3治疗组肺癌患者外周血Treg细胞比值在治疗后逐渐下调,Treg细胞比值由8.98±3.12%降为5.92±1.99%,与对照组相比具有统计学差异(P<0.01)。但NK细胞与治疗前水平相比有所增高,比例由10.12±3.12%升高为13.34±3.10%(P<0.05)。4治疗组肺癌患者外周血Th2(IL-4、IL-10)水平下降,至4周左右最低,与对照组相比具有统计学差异(P<0.01);治疗后患者外周血Th1(IL-2、INF-γ)水平显著增加,在4周达到高峰(P<0.01),8周后下降(P<0.05),与对照组相比具有统计学差异。治疗后IL-4由23.41±5.19 pg/ml持续下降,于4周达到9.11±6.52 pg/ml,在8周有所回升,达到17.11±6.31 pg/ml。治疗后IL-10由16.31±5.17 pg/ml连续下降,在4周达到5.13±1.91 pg/ml,在8周有所升高,达到10.22±4.98 pg/ml。治疗后IL-2由21.21±5.98 pg/ml连续增高,在4周达到72.31±6.11 pg/ml,在8周下降,达到55.31±5.12 pg/ml。治疗后INF-γ由29.13±9.88 pg/ml持续增高,在4周达到61.71±10.03 pg/ml,在8周下降,达到35.28±9.18 pg/ml。5肺癌患者外周血CYFRA21-1、PRO-GRP、NSE等肿瘤标志物在CIK细胞治疗前后相比均有统计学差异。CYFRA21-1由6.12±0.21 ng/ml下降为3.02±0.13 ng/ml(P<0.01)。PRO-GRP由92.11±5.10 pg/ml下降为48.27±4.92 pg/ml(P<0.01)。NSE由29.44±2.95 ng/ml下降至14.93±2.98 ng/ml(P<0.01)。6 27例肺癌患者经CIK细胞治疗后,治疗组肺癌患者治疗后生命质量有明显提高,治疗过程中无其它明显不良反应。结论:1肺癌患者在CIK细胞治疗后,大多数患者外周血NSE、CYFRA21-1、PRO-GRP等肿瘤标志物明显降低。血液肿瘤标志物的出现,可以在症状出现前1~6个月检测到,尤其是肿瘤发生复发及转移时,血液肿瘤标志物可比体征及影像诊断提前3~6个月。所以,肿瘤标志物的检测可作为规范化CIK细胞治疗的一个监测手段,用于动态观察不同类型肺癌患者的治疗效果。2 CIK细胞治疗在抑制机体免疫Th1/Th2的漂移以及恢复Th1/Th2的平衡中具有重要作用,从而使肺癌患者保持良好的抗肿瘤免疫状态。3 Treg细胞比例的升高与肺癌的发生、发展密切相关,对机体的抗肿瘤免疫反应起负向调节作用。在自体CIK治疗后,Treg细胞比例及其活性明显降低。4 CIK细胞过继免疫治疗肺癌不但疗效显著,还能有效改善生活质量,提高患者的免疫功能,并且副作用小。