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目的：基于动物模型探讨补肾活血方对绝经后骨质疏松大鼠cAMP-PKA-CREB信号通路的影响，以CREB、BMP2的RNA表达为代表，剖析中医药防治PMOP的分子机制，为中医药防治PMOP提供一定的理论依据。
方法：取60只6月龄雌性SD大鼠，所有动物随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=15)、中药组(n=15)、西药组(n=15)，饲养1月后建造绝经后骨质疏松模型，术前禁食12h，模型组、中药组、西药组以30mgkg水合氯醛腹腔注射麻醉后，取仰卧位,于无菌条件下在下腹部切口,结扎双侧输卵管并摘除卵巢后缝合，假手术组切除双侧一小块脂肪，术后大鼠分笼饲养，连续三天注射青霉素5万u/只预防感染。观察各组实验动物的一般状况，每周称重1次并记录，同时观察饮食、活动、精神状况、皮色及体质等情况。药物干预2月后进行双能X线检查显示,骨密度检测结束后禁食12h?10%水合氯醛麻醉(0.4ml/100g体重)，麻醉后手术打开腹腔，采集标本:(1)血液:中心静脉取血，离心后提取血清，放置-20℃冰箱，以便指标检测。(2)股骨:取大鼠双侧股骨，剔除附着肌肉及筋膜，尽量保持骨膜完整，放置于10%多聚甲醛溶液中固定24h以上，10%EDTA脱钙液中脱钙3-4周，每3天更换脱钙液，直至针头可轻松刺入，流水冲洗后常规包埋切片?另外一部分股骨标本用剪碎，加入0.5mLBufferRL1用玻璃匀浆器或电动匀浆器将组织研磨均匀，移入容器内并放入-80℃冰箱冻存待测。HE染色后骨组织在镜下观察，评价各组炎性细胞浸润情况，计算空骨陷窝率。RT-PCR检测骨组织中CREB、BMP2的基因表达情况，所有实验数据采用SPSS22.0软件进行统计分析与处理.
结果：(1)一般情况假手术组大鼠精神状况可，毛发光泽，体重增加，无其他异常变化；模型组大鼠精神差，毛发晦涩，有脱毛现象，体重明显下降等；中药组、西药组大鼠精神可，毛发质量较假手术组差，体重下降不明显，中药组大鼠各项情况更接近于正常组。(2)药物干预2月后进行双能X线检查显示：模型组大鼠较假手术组大鼠骨密度下降明显，治疗组大鼠骨密度较模型组显著升高，且中药组骨密度更近于假手术组，差异具有统计学差异。(3)各组大鼠血清ALP、TRACP含量测定结果显示:与正常组比较，模型组ALP水平明显降低(P＞0.05无统计学意义)，可验证造模成功；中药组、西药组与模型组比较可显著提高ALP水平(P＜0.05)，且中药组提高较明显，更接近假手术组；与假手术组比较，模型组的TRACP水平明显升高(P＜0.01)，中药组、西药组与模型组比较TRACP水平显著降低(P＜0.01)，且中药组降低幅度较大。(4)HE染色后骨组织在镜下观察见：骨骼正常组细胞结构完整、清晰，形态大小正常，骨髓腔小，骨小梁粗壮；模型组可见骨髓腔增大，骨小梁部分断裂，空洞较多；中药干预后可见骨小梁增粗，排列整齐，骨膜外少见骨原细胞，空洞减少；西药组与中药组情况相似，但空洞较多。(5)各组大鼠骨BMP2、CREBmRNA表达检测结果显示:模型组与假手术组比较股骨中BMP2、CREBmRNA表达明显降低，但无统计学意义(P＞0.05)；与模型组对照，中药组、西药组可上调BMP2、CREBmRNA表达情况(P＜0.05)；中药组与假手术组比较，BMP2、CREBmRNA表达升高，(P＜0.05)具有统计学意义；中药组与西药组对比，BMP2mRNA无明显差异(P＞0.05)，而CREB表达有差异(P＜0.05)。
结论：(1)两种治疗方法均能改善大鼠的一般情况，并促进骨组织中BMP2、CREB的表达，但补肾活血方的作用更加显著；(2)补肾活血方可以刺激cAMP-PKA-CREB信号通路，影响骨代谢中的骨形成作用，使骨量上升，减少骨钙流失，促进骨质成熟，缓解绝经后骨质疏松症的临床症状，对骨骼情况起到了有效改善作用。
方法：取60只6月龄雌性SD大鼠，所有动物随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=15)、中药组(n=15)、西药组(n=15)，饲养1月后建造绝经后骨质疏松模型，术前禁食12h，模型组、中药组、西药组以30mgkg水合氯醛腹腔注射麻醉后，取仰卧位,于无菌条件下在下腹部切口,结扎双侧输卵管并摘除卵巢后缝合，假手术组切除双侧一小块脂肪，术后大鼠分笼饲养，连续三天注射青霉素5万u/只预防感染。观察各组实验动物的一般状况，每周称重1次并记录，同时观察饮食、活动、精神状况、皮色及体质等情况。药物干预2月后进行双能X线检查显示,骨密度检测结束后禁食12h?10%水合氯醛麻醉(0.4ml/100g体重)，麻醉后手术打开腹腔，采集标本:(1)血液:中心静脉取血，离心后提取血清，放置-20℃冰箱，以便指标检测。(2)股骨:取大鼠双侧股骨，剔除附着肌肉及筋膜，尽量保持骨膜完整，放置于10%多聚甲醛溶液中固定24h以上，10%EDTA脱钙液中脱钙3-4周，每3天更换脱钙液，直至针头可轻松刺入，流水冲洗后常规包埋切片?另外一部分股骨标本用剪碎，加入0.5mLBufferRL1用玻璃匀浆器或电动匀浆器将组织研磨均匀，移入容器内并放入-80℃冰箱冻存待测。HE染色后骨组织在镜下观察，评价各组炎性细胞浸润情况，计算空骨陷窝率。RT-PCR检测骨组织中CREB、BMP2的基因表达情况，所有实验数据采用SPSS22.0软件进行统计分析与处理.
结果：(1)一般情况假手术组大鼠精神状况可，毛发光泽，体重增加，无其他异常变化；模型组大鼠精神差，毛发晦涩，有脱毛现象，体重明显下降等；中药组、西药组大鼠精神可，毛发质量较假手术组差，体重下降不明显，中药组大鼠各项情况更接近于正常组。(2)药物干预2月后进行双能X线检查显示：模型组大鼠较假手术组大鼠骨密度下降明显，治疗组大鼠骨密度较模型组显著升高，且中药组骨密度更近于假手术组，差异具有统计学差异。(3)各组大鼠血清ALP、TRACP含量测定结果显示:与正常组比较，模型组ALP水平明显降低(P＞0.05无统计学意义)，可验证造模成功；中药组、西药组与模型组比较可显著提高ALP水平(P＜0.05)，且中药组提高较明显，更接近假手术组；与假手术组比较，模型组的TRACP水平明显升高(P＜0.01)，中药组、西药组与模型组比较TRACP水平显著降低(P＜0.01)，且中药组降低幅度较大。(4)HE染色后骨组织在镜下观察见：骨骼正常组细胞结构完整、清晰，形态大小正常，骨髓腔小，骨小梁粗壮；模型组可见骨髓腔增大，骨小梁部分断裂，空洞较多；中药干预后可见骨小梁增粗，排列整齐，骨膜外少见骨原细胞，空洞减少；西药组与中药组情况相似，但空洞较多。(5)各组大鼠骨BMP2、CREBmRNA表达检测结果显示:模型组与假手术组比较股骨中BMP2、CREBmRNA表达明显降低，但无统计学意义(P＞0.05)；与模型组对照，中药组、西药组可上调BMP2、CREBmRNA表达情况(P＜0.05)；中药组与假手术组比较，BMP2、CREBmRNA表达升高，(P＜0.05)具有统计学意义；中药组与西药组对比，BMP2mRNA无明显差异(P＞0.05)，而CREB表达有差异(P＜0.05)。
结论：(1)两种治疗方法均能改善大鼠的一般情况，并促进骨组织中BMP2、CREB的表达，但补肾活血方的作用更加显著；(2)补肾活血方可以刺激cAMP-PKA-CREB信号通路，影响骨代谢中的骨形成作用，使骨量上升，减少骨钙流失，促进骨质成熟，缓解绝经后骨质疏松症的临床症状，对骨骼情况起到了有效改善作用。