中药补骨脂为豆科植物补骨脂（Psoralea corylifolia L.）果实,性温,味辛,具补肾助阳之功效。临床上主治肾虚冷泻,小便频数,阳萎,腰膝冷痛,虚寒喘咳等病症。现代研究表明,补骨脂具有扩张血管,增加心肌收缩力,防止骨吸收、增加骨密度,抗肿瘤,抗菌,雌性激素样作用,抗氧化,治疗白癜风等多重药理活性,到目前为止,国内外研究人员已从补骨脂中分离出香豆素类、黄酮类、萜酚类等化合物四十余种,其中,香豆素类和黄酮类化合物在补骨脂的药理活性研究中发挥着重要作用。淫羊藿米源于小檗科淫羊藿属（Epimedium）的多种植物。李时珍在《本草纲目》中称其有“益精气、坚筋骨、实腰膝、强心力”之功效。现代药理实验研究表明,淫羊藿能增加心脑血管血流量,促进造血功能、免疫功能及骨代谢,具有抗衰老、抗肿瘤等功效。但是,目前对淫羊藿黄酮以及淫羊藿作用的物质基础的研究尚不够深入。近年来,国内外对中药复方进行了广泛的研究,主要集中在药理和临床疗效上,而对其化学物质基础及其配伍机理的研究不多。本试验拟采用现代科学技术方法研究单药和配伍作用的化学物质基础,为其临床应用奠定基础。第一、采用高速逆流色谱仪器（HSCCC）对补骨脂、淫羊藿及其复方总黄酮进行分离纯化,初步建立分离纯化工艺。在本次试验中,我们通过筛选,补骨脂总黄酮溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水,按比例1:1:1:1配置;淫羊藿总黄酮的溶剂系统为氯仿-甲醇-水,按比例4:3.3:2配制:复方总黄酮的溶解系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水,按比例1:1:1:1配置。以上相溶液为同定相,下相溶液为流动相,提取温度为25℃,转速为800r/min,通过254nm紫外检测为纯化工艺进行试验,结果补骨脂分离得6个峰物质,淫羊藿分离得到4个峰物质,复方总黄酮分离得到5个峰物质,且复方总黄酮分离的5个峰物质中,峰Ⅰ物质与淫羊藿峰Ⅰ一致,峰Ⅱ物质与补骨脂峰Ⅰ物质一致,其余3个推测为产生的新物质;并对其进行初步的理化性质鉴定,初步确定补骨脂峰Ⅳ、Ⅴ物质分别为补骨脂黄酮醇和二氢黄酮类化合物,淫羊藿峰Ⅱ、Ⅲ物质分别为淫羊藿次苷和淫羊藿苷,复方总黄酮峰Ⅲ物质为黄酮类化合物,其余成分尚不能确定,有待进一步研究。第二、通过体外成骨细胞试验,以细胞增殖为检测指标米检测补骨脂、淫羊藿及其复方总黄酮对正常成骨细胞增殖的影响。结果显示,补骨脂、淫羊藿及其复方总黄酮均在浓度1.0×10^-7g/L促进正常成骨细胞增殖,与空白组比较呈显著性差异（0.01＜P＜0.05）,而其他浓度组差异不显著;补骨脂总黄酮1.0×10^-6g/L、1.0×10^-7g/L组,复方总黄酮1.0×10^-6g/L组对氧化损伤后细胞的增殖均有促进作用,与模型组比较呈显著性差异（0.01＜P＜0.05）。第三、通过体外肾细胞试验,以细胞增殖为检测指标来检测补骨脂、淫羊藿及其复方总黄酮对正常肾细胞增殖的影响。结果显示,补骨脂总黄酮浓度为1.0×10^-7g/L时、淫羊藿总黄酮浓度为1.0×10^-6g/L、1.0×10^-7g/L时增殖效果显著（P＜0.05）,复方总黄酮组浓度为1.0×10^-7g/L,12h,18h是效果显著（P＜0.05）;补骨脂总黄酮与复方总黄酮的1.0×10^-7g/L组均对氧化损伤的细胞有保护作用,并促进其增殖,与模型组比较,有显著差异（0.01＜P＜0.05）。第四、利用细胞氧化及邻苯三酚自氧化的体外氧化模型研究补骨脂、淫羊藿及其复方总黄酮抗氧化作用。（1）采用H₂O₂所致的成骨细胞氧化模型,通过测定细胞SOD活性、MDA含量探讨了三种成分对成骨细胞、肾细胞的保护和修复作用。结果显示,补骨脂总黄酮和复方总黄酮组的SOD酶活性增强,MDA含量降低,与模型组比较,差异显著（0.01＜P＜0.05）,表明补骨脂总黄酮和复方总黄酮可预防细胞氧化损伤。（2）采用邻苯三酚自氧化模型考察三种成分的抗氧化活力。试验结果表明,补骨脂总黄酮和复方总黄酮都具有显著的体外抗氧化活性,且复方总黄酮强于补骨脂总黄酮,最后为淫羊藿总黄酮。综上所述,本次试验采用HSCCC对补骨脂、淫羊藿及复方总黄酮进行了分离纯化,初步鉴定出补骨脂中的黄酮醇和二氢黄酮类化合物,淫羊藿黄酮中的淫羊藿苷和淫羊藿次苷,复方总黄酮中的黄酮类化合物。初步建立了补骨脂、淫羊藿及复方总黄酮HSCCC纯化条件。且补骨脂、淫羊藿及其复方总黄酮均可促进成骨、肾细胞的增殖,保护细胞减少H₂O₂对细胞的氧化损伤,其中复方总黄酮效果优于单药。其机理可能是与其提高细胞SOD酶活性,减少氧自由基对细胞氧化损伤有关。