目的：建立鱼腥草中总生物碱的含量测定方法,并确定鱼腥草中总生物碱有效部位的最佳提取工艺,以及获得初步纯化分离工艺路线。 　　方法：通过对酸性染料比色法的显色条件进行优选以确定显色条件,同时对鱼腥草药材中总生物碱的多种提取方法进行考察,以确定提取方法,采用确定的提取方法制备鱼腥草样品溶液,紫外-可见分光光度法测定其在 412nm 波长下的紫外吸光度,进而得到了鱼腥草中总生物碱的含量。同时采用单因素实验考察了影响鱼腥草总生物碱提取工艺的主要因素,并确定了乙醇浓度、溶剂用量、提取温度、提取时间等四个因素为主要影响因素。选择正交试验设计 L9(34)对鱼腥草总生物碱提取工艺进行优选,酸性染料比色法进行显色反应,并以盐酸小檗碱为对照品,紫外-可见分光光度法测定其在412nm波长处的吸光度,进而得到总生物碱含量,通过计算总生物碱转移率,采用SPSS17.0软件对实验数据进行处理,最终获得了鱼腥草总生物碱有效部位的最佳提取工艺。经过三批验证试验,证实该提取方法可行,可以用于鱼腥草总生物碱有效部位的提取。 　　利用获得的最佳提取工艺,制备了鱼腥草提取物,加入1%的盐酸溶液溶解,并加入盐酸调pH为2-3,依次加入石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,并对各部位进行生物碱显色反应,对于显色反应为阳性反应的酸水部位,通过加入氨水调节 pH 为 9-10,依次加入乙醚、氯仿萃取,并进行各部位的显色反应鉴别,显色反应为阳性的乙醚部位和氯仿部位,合并两部位进行减压回收溶剂得到浸膏,选择硅胶G板,进行不同展开剂的选择,并喷入显色剂进行薄层色谱法鉴别；同时选择Agilent SB-Aq C18色谱柱；乙腈-0.01%三乙胺溶液(40：60)为流动相；流速：1mL/min；检测波长：340nm 为色谱条件进行高效液相色谱鉴别,并计算纯度,根据薄层色谱鉴别的斑点与高效液相色谱图中的峰的个数以及纯度进行纯化效果初步评价。 　　结果：酸性染料比色法测定鱼腥草总生物碱的显色条件为：分别吸取盐酸小檗碱对照品溶液与供试品溶液各1mL置于分液漏斗,加1%的盐酸溶液补足至1.6mL,依次加入3 mL0.5g/L溴钾酚绿溶液、4 mL pH 5.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液、10 mL氯仿,振摇 2min,静置 30min,分取氯仿层；同时以 1%盐酸作为空白试剂,按上述方法制备空白溶液,紫外-可见分光光度法在其412 nm的波长处吸光度。 　　通过正交试验设计 L9(34)优选出的鱼腥草中总生物碱有效部位的提取工艺为：选择加热回流提取,提取温度为80℃,加入20倍80%乙醇,提取2次,2h/次。经过三批实验验证,证实最佳工艺可行,利用最佳提取工艺制备了鱼腥草总生物碱提取物,通过加入不同极性的有机溶剂萃取得到总生物碱,选择硅胶G板,并喷入显色剂,结果薄层色谱中得到了四个斑点；在高效液相色谱法鉴别中,选择340nm为检测波长,HPLC图中出现四个分离效果较好的色谱峰,计算得到的纯度为54.76%。 　　结论：本实验建立了鱼腥草中总生物碱提取方法,并确定了酸性染料比色法的显色条件,最终获得了鱼腥草总生物碱有效部位的提取工艺参数,同时获得了对鱼腥草总生物碱初步纯化工艺,但是纯化效果不理想,纯化工艺进一步深入研究。