基于质粒的Akt1特异性siRNA和P53共表达协同抑制肝细胞癌细胞的增值、迁移和侵袭

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xym1013
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目的:探讨Akt1特异性si RNA和P53共表达质粒对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。方法:我们构建了一种共表达Akt1特异性si RNA和野生型P53基因的双表达质粒(pSi-Akt1-P53)。将pSi-Akt1-P53共表达质粒转染至肝癌Hep-G2细胞,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质免疫印迹法检测细胞中Akt1和P53表达被调控情况。然后将这种共表达质粒转染至Hep G2细胞中,并同sh Akt1质粒和P53质粒相比较,分别采用CCK-8和Ed U实验、划痕实验、Transwell侵袭实验、流式细胞术检测其对Hep-G2细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。结果:pSi-Akt1-P53共表达质粒转染至肝癌Hep-G2细胞后显著地减少Hep-G2细胞中Akt1蛋白的表达量,同时显著增加P53蛋白的表达量。与sh Akt1质粒和P53质粒相比,pSi-Akt1-P53共表达质粒更显著地抑制Hep-G2细胞的增殖、迁移和侵袭能力,同时更显著地促进Hep-G2细胞的凋亡。结论:pSi-Akt1-P53共表达质粒能非常显著地抑制肝癌Hep-G2细胞的增殖、迁移和侵袭能力,有效促进肝癌Hep-G2细胞凋亡。
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