白刺愈伤组织培养中外源激素对内源激素影响的研究

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唐古特白刺(Nitraria tangutorum Bobr.)是我国西北荒漠地区的特有植物种,具有重要的生态防护作用和经济利用价值。本论文在解决白刺愈伤组织的诱导条件的基础上,采用液相色谱测定技术,就茎尖和愈伤组织内源激素水平动态变化以及外源激素对愈伤组织中内源激素的影响等进行了研究,以探讨白刺愈伤组织培养中内外源激素的相互作用关系,从而解决白刺愈伤组织培养再生的适宜激素配比问题等。主要研究结果如下:1.筛选出白刺愈伤组织的适宜诱导条件,即以茎段为外植体,选择MS基本培养基添加0.50mg/L 2,4-D进行诱导,愈伤组织诱导率达到94%,相对生物量为0.59,且表现出易于分化再生类型的愈伤形态特征。2.对天然、组培苗白刺顶芽的内源激素含量进行了测定,其中天然白刺顶芽的平均内源生长素为149.02ng/g,细胞分裂素为139.89ng/g,赤霉素为295.61ng/g,脱落酸为250.45ng/g,而Zt/IAA达0.94,GA3/ABA为1.18,IAA/ABA和Zt/GA3值分别为0.60和0.47。组培苗顶芽的内源生长素含量为165.78ng/g,细胞分裂素为143.14ng/g,内源赤霉素为307.39ng/g,脱落酸为240.81ng/g,除脱落酸含量外,组培苗顶芽其他激素的含量都要高于天然白刺顶芽;其Zt/IAA为0.86,GA3/ABA为1.28,IAA/ABA和Zt/GA3值比天然植株顶芽中的稍高,分别为0.69和0.47。3.带腋芽白刺组培苗茎段在不添加激素培养基上培养过程中,随着顶芽对茎段腋芽的顶端优势作用消失,腋芽萌发伸长,带芽茎段的赤霉素、脱落酸含量变化相对较小,而生长素含量逐渐升高,细胞分裂素含量则逐渐降低,并在第15d后趋于稳定,最终带芽茎段各种内源激素含量及比值与天然白刺及组培苗的顶芽相当,表明带腋芽白刺组培苗茎段在不添加任何激素培养基上转化为顶芽的过程,实际是细胞分裂素与生长素含量的消长过程。4.外源激素与内源激素在白刺愈伤组织培养中存在较强的相互作用,添加不同的单一外源激素后,均可以促进白刺愈伤组织的内源激素合成,使其内源激素总体水平提高,同时还可以引起激素问的比值发生变化,但不同外源激素对白刺愈伤组织内源激素影响存在一定的差异,且或在某种内源激素含量方面,或在不同内源激素比值方面远远偏离项芽的激素分布状态。5.对天然白刺、组培苗的顶芽与添加外源激素培养的愈伤组织的内源激素进行比较,发现在添加含量均为1.00mg/L的NAA和6-BA或NAA和Kt时,愈伤组织的内源激素水平以及相互比例关系与天然白刺顶芽以及组培苗顶芽接近,表明该两个外源激素种类及配比组合有可能适合白刺愈伤组织的分化、再生。
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