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P53是重要的肿瘤抑制基因,经研究表明,在人类50%以上的肿瘤组织中p53基因均有不同程度的突变,目前遗传学认为其可能是肿瘤中最常见的遗传学改变,说明该基因的改变很可能是人类肿瘤产生的主要发病因素。由p53介导的细胞信号转导途径在调节细胞正常生命活动中起重要作用,但其与细胞内其它信号转导通路之间的联系相当复杂。本次实验主要采用裸鼠模型将SGC-7901人胃癌细胞直接接种,再予以黄芪多糖治疗,观察黄芪多糖对SGC-7901人胃癌细胞移植瘤裸鼠的体重、体积、抑瘤率等多方面的作用；同时检测P53下游Bcl2/Bax、Fas/FasL表达及PTEN、NF-κB、CDX2基因表达的结果。找出黄芪多糖对P53基因介导的信号传导与胃癌发生发展之间的关系。最后采用体外培养SGC-7901人胃癌细胞,采用MTT,观察SGC-7901人胃癌细胞的增殖和细胞周期在黄芪多糖的作用下有什么变化。第一部分黄芪多糖对SGC-7901人胃癌细胞移植瘤裸鼠的影响第一节人胃癌细胞SGC-7901的培养与收集采用常规培养人胃癌细胞SGC-7901,随后对人胃癌SGC-7901细胞取对数生长期,制成单细胞悬液,在台盼蓝染色计数下将细胞浓度调整至1.0×108/ml。通过上述方法即可得到本实验所需的人胃癌细胞SGC-7901单细胞悬液。最后收集对数生长期的SGC-7901人胃癌细胞,制备成相应浓度的单细胞悬液,转移至裸鼠。第二节黄芪多糖对SGC-7901人胃癌细胞移植瘤裸鼠的体重、肿瘤体积、抑瘤率以及病理学检查结果的影响对裸鼠使用培养后的SGC-7901人胃癌细胞进行接种,得到荷瘤裸鼠。将其随机分为模型组、黄芪多糖高剂量组、5-FU和黄芪多糖低剂量组,于治疗开始第0、7、14、21、28天分别称量裸鼠体重,测量肿瘤体积；停药后将裸鼠处死,将瘤组织剥离后称取瘤重,并计算其抑瘤率；结果显示模型组裸鼠体重增长明显,给予黄芪多糖干预后,体重差异无统计学意义,氟尿嘧啶组裸鼠体重明显降低,与模型组相比具有显著性差异；模型组裸鼠肿瘤体积与重量明显增大,黄芪多糖高、低剂量组与氟尿嘧啶组裸鼠肿瘤增长缓慢,体积与重量减小较为明显,在统计学上具有显著性差异；病理学检查结果显示模型组见多量肿瘤细胞弥漫性生长,瘤细胞大小不均一,形成明显的结节状,核大而浓染,核异型性明显,散在的瘤细胞出现变性坏死,黄芪多糖干预治疗后,瘤结节体积缩小,结节内可见少量的坏死,残存的肿瘤细胞减少,与实验组比较有明显好转。综上,我们可明显发现黄芪多糖能够抑制SGC-7901人胃癌细胞移植瘤的生长。第三节黄芪多糖对SGC-7901人胃癌细胞移植瘤组织中P53下游基因表达的影响采用体外培养的SGC-7901人胃癌细胞制作荷瘤裸鼠,用免疫组化法观察黄芪多糖对SGC-7901细胞移植瘤组织中Bcl2/Bax、Fas/Fasl及PTEN、NF-κB、CDX2表达的影响,探究黄芪多糖对SGC-7901人胃癌细胞移植瘤的抑制效应及机制。经检测表明黄芪多糖对SGC-7901细胞移植瘤具有明显的抑制作用,其机制可能与下调Bcl2/Bax和上调Fas/Fasl有关,同时APS可上调PTEN、CDX2表达和下调NF-κB(p65)的表达,提示黄芪多糖可诱导胃癌细胞凋亡。第二部分黄芪多糖对SGC-7901人胃癌细胞的增殖、凋亡、周期的影响在体外培养SGC-7901人胃癌细胞,给予不用浓度、在不同时间采用黄芪多糖干预,用MTT、流式细胞仪法检测细胞凋亡。实验数据显示SGC-7901人胃癌细胞早期凋亡、晚期凋亡的细胞增多,提示黄芪多糖可诱导SGC-7901人胃癌细胞凋亡；同时检测黄芪多糖对SGC-7901人胃癌细胞周期的影响；证明黄芪多糖对人胃癌SGC7901细胞的增殖有一定的抑制作用,其机理可能为通过阻止SGC-7901细胞由S期进入G2期,延缓7901细胞周期进程,使细胞的增殖速度减慢,抑制肿瘤细胞的增殖。