霉茶化学成分及指纹图谱的研究

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我国葡萄科蛇葡萄属Ampelopsis有20多种和变种。资源丰富、分布广泛。除白蔹为常用中药外,绝大部分为民间中草药,多具有活血散疾、消炎、止血、清热解毒等功效,用于治疗风湿痹痈、骨髓炎、无名肿毒等疾病。本文研究霉茶即为湖北恩施地区的民间用药。具有降血压、降胆固醇之功效,临床上用于治疗原发性高血压病,疗效显著。其主要成分二氢杨梅素(3,5,7,3′,4′,5′-六羟基-2,3-双氢黄酮醇ampelopsin/dihydromyricetin)又名双氢杨梅树皮素、福建茶素、白蔹素、蛇葡萄素等,是黄酮类化合物的重要一员。随着黄酮类化合物成为天然植物活性成分的研究热点后,该化合物也受到人们的重视和关注,从目前研究情况来看蛇葡萄素在蛇葡萄属植物中大量存在,如广泛分布于我国的广东、广西、云南、湖南、湖北、江西等省区的显齿蛇葡萄植物的幼嫩茎叶中含量达27%-28%,最高部位可达40%以上;粤蛇葡萄中幼嫩茎叶中含量可达25%以上。在天然植物中单体含量如此之高,实属罕见。霉茶作为民间单方已应用多年,具有明确的降血压疗效,在应用方面积累了很多宝贵经验。然而,目前霉茶系统全面研究和新药开发均没有开展,大大限制了该药材的应用。本文对霉茶化学成分和霉茶药材的指纹图谱进行了相关研究,为进一步将其开发成中药新药提供充分的实验依据。首先,对霉茶及该属植物的研究进展进行资料收集和整理,确定其有效成分及药理作用,以及有效成分的性质,为提取纯化工艺指明了方向。本文采用系统溶剂法和色谱法对霉茶进行了提取分离研究:分离得到8个单体成分。通过对所得8种化合物的1H-NMR、13C-NMR、Ms等色谱图的分析,以及进行的TLC或熔点测定,综合进行结构解析,确定了5个化合物结构,分别为β-谷甾醇Ⅱ、齐墩果酸Ⅲ、槲皮素Ⅵ、杨梅素Ⅶ、蛇葡萄素Ⅷ,化合物Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ结构待定,其中化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ3种成分均为首次从该植物中分离得到。其次,首次采用高效液相色谱法对霉茶药材进行了指纹图谱研究。考察了10批不同采集时间的霉茶药材的高效液相色谱图,进行比较分析后标定了12个共有峰,建立了指纹图谱共有模式。同时,还对其主要色谱峰进行了归属,3、9和11号峰分别为蛇葡萄素、槲皮素、杨梅素。霉茶药材指纹图谱的各项技术参数均符合国家药品食品监督管理局颁布的《中药注射剂指纹图谱技术要求(暂行)》相关要求,方法重现性和稳定性良好,从而为其资源品质的评价提供了科学依据,为该药用植物制定与国际接轨的质量评价标准奠定了基础。
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