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艾蒿是一种在我国广泛分布的菊科植物,是一种集食品营养价值及药用价值为一身的天然中草药,含有多种具有生理活性的化学成分,其中的黄酮具有很强的抗氧化性。黄酮是多酚类物质,具有高度羟基化的结构,能够起到抗氧化、清除自由基、抑菌等作用,有很好的开发利用价值。(1)本研究首先测定艾蒿叶和茎中蛋白质、总糖、总酸、总多酚、总黄酮等主要化学成分的含量,结果表明武汉狮子山所产艾蒿黄酮含量较高,所以确定为实验材料。(2)对艾蒿黄酮(Flavonoids from Artemisia argyi,简称FA)的提取工艺进行了初步探讨,通过单因素实验,在中心组合实验基础上,运用响应面分析法得出了提取FA的最佳工艺组合:时间149 min,乙醇浓度56%,温度72℃,料液比1:20,提取2次。在此最佳工艺组合下FA的平均提取率可达91.2%。采用AB-8大孔树脂纯化艾蒿黄酮的最佳条件:(树脂柱柱长度48cm;柱内直径5.2cm;初始上样液黄酮含量为37.56mg/mL)上样量为16mL,淋洗剂为pH4的蒸馏水,洗脱剂为pH4的50%乙醇,洗脱剂用量为5倍柱体积,树脂可以重复使用3次,产品真空干燥后黄酮纯度达69.37%。乙酸乙酯相(FA2)纯度达78.28%,得率为2.64%;FA2经过葡聚糖凝胶纯化后(FAS),黄酮含量达到99.16%,得率为1.89%。(3)采用UV、IR、HPLC、HPLC-ESI/MS等现代分离检测技术对艾蒿黄酮葡聚糖凝胶纯化物的鉴定进行了深入研究。结果表明,艾蒿中含有以芹菜素、槲皮素、香叶木素为苷元的黄酮。(4)通过体外、体内实验研究了艾蒿黄酮的抗氧化活性。①体外抗氧化研究表明,FA2及FAS可有效清除超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢,抑制DNA氧化损伤。同时还比较了艾蒿黄酮和V_C的抗氧化作用,结果表明:艾蒿黄酮抗氧化效应远远高于V_C。在所测试的四个体系中,二者清除超氧阴离子的能力分别为Vc的1.5倍和2.7倍;FAS清除羟基自由基的能力为Vc的1.3倍,FA2清除羟基自由基的能力略低于Vc;清除过氧化氢的能力分别为Vc的1.8倍和4.5倍,抑制DNA氧化损伤的能力分别为Vc的1.3倍和1.6倍。②用硫代巴比妥酸(TBA)法测定艾蒿黄酮对小鼠红细胞溶血、小鼠肝组织匀浆及肝线粒体脂质过氧化产物MDA生成的影响,结果表明艾蒿黄酮在0.5-10.0mg/mL浓度范围内可提高体外小鼠血清抗活性氧能力,能抑制小鼠红细胞溶血,抑制小鼠肝组织匀浆及肝线粒体MDA的生成和肝线粒体肿胀,说明艾蒿黄酮具有体外对小鼠细胞器、细胞的抗氧化作用。③艾蒿黄酮的体内抗氧化实验表明,艾蒿黄酮对降低小鼠肝脏MDA含量有显著的作用;能提高小鼠血清SOD活性;说明艾蒿黄酮具有一定的体内抗氧化作用。