随着石化能源等不可再生资源的日益枯竭，人们试图寻找可以代替石化燃料的新型能源。利用纤维素酶将纤维素降解为简单糖，进而发酵生产乙醇，为新能源的开发提供了一个新方法。本研究针对福寿螺（Ampullaria crossean）内源性多功能纤维素酶基因EGX（Gene Bank Accession NO．AY285999），以蛋白质二级结构α螺旋和β折叠为单位进行末端缺失，利用巴斯德毕赤酵母表达系统表达末端缺失蛋白片段，研究蛋白N端及C端α螺旋和β折叠的缺失对内切-β-1,4-葡萄糖苷酶（E.C.3.2.1.4）、外切-β-1,4-葡萄糖苷酶（E.C.3.2.9.11）、内切-β-1,4-木聚糖酶（E.C.3.2.1.8）活力的影响，研究其作用机理，为酶分子的蛋白质工程改造提供理论依据。根据egx cDNA全长序列，设计了7对引物5-1、5-2、5-3、5-4、5-5、3-1、3-2，用于PCR扩增末端缺失的基因片段。以EGX基因cDNA全长序列为模版，分别得到1132bp、1089bp、1056bp、891bp、828bp、1044bp、921bp片段，插入载体pPIC9K，转化巴斯德毕赤酵母GS115，甲醇诱导表达获得7种末端缺失蛋白：5-1（N端缺失一个α螺旋）、5-2（N端缺失α螺旋-β折叠）、5-3（N端缺失α螺旋-β折叠-α螺旋）、5-4（N端缺失α螺旋-β折叠-α螺旋-β折叠）、5-5（N端缺失α螺旋-β折叠-α螺旋-β折叠-α螺旋）、3-1（C端缺失4个β折叠）、3-2（C端缺失4个β折叠-2个α螺旋）。完成了7种蛋白的内切-β-1,4-葡萄糖苷酶、内切-β-1,4-木聚糖酶、外切-β-1,4-葡萄糖苷酶活性测定。研究结果表明，5-1的内切-β-1,4-葡萄糖苷酶、内切-β-1,4-木聚糖酶、外切-β-1,4-葡萄糖苷酶活性与EGX全长蛋白近似。5-2的内切-β-1,4-木聚糖酶活性与EGX全长蛋白近似，内切-β-1,4-葡萄糖苷酶、纤外切-β-1,4-葡萄糖苷酶活性与EGX全长蛋白相比活性下降很多。5-3、5-4、5-5、3-1、3-2的外切-β-1,4-葡萄糖苷酶、内切-β-1,4-木聚糖酶、外切-β-1,4-葡萄糖苷酶活性很微弱。N末端第一个β折叠到C端之间序列的完整性对内切-β-1,4-葡萄糖苷酶、外切-β-1,4-葡萄糖苷酶活性是重要的。N端第二个α螺旋至C段之间序列的完整性对内切-β-1,4-木聚糖酶活性也是非常必要的。在研究过程中，得到了3段EST序列，它们的蛋白序列分别含有vWFAsubfaminlyECM，PeptidaseM41，FN3结构域。