改进型邻苯二甲醛衍生化法及乙酰胆碱酯酶磁性微珠亲和筛选的设计与应用研究

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腐胺是食物腐败变质过程产生的一种有害的化学物质,食品中腐胺含量的增加不仅影响食物的风味,更会对人的身体健康造成损害。因此,建立一种快速检测、高选择性、结果准确的腐胺分析方法对于保障食品安全具有重要意义。本论文通过对邻苯二甲醛衍生化方法的系统优化,建立了一种高选择性比色检测方法,不需经过复杂的前处理过程,提取后直接衍生化,检测结果可以通过目视比色定性分析或结合紫外-可见分光光度计定量分析。  通过单因素变量实验和响应曲面法,优化了邻苯二甲醛衍生化反应的主要参数,包括衍生化试剂浓度、反应温度、反应时间、溶液pH值,确定了衍生化实验条件为:pH=5.5的醋酸-醋酸钠缓冲溶液,邻苯二甲醛和巯基乙酸均为0.2mol/L(20.0μL),水浴温度为60℃,反应时间为12min,检测波长为490nm。在最优条件下考察了方法的选择性和抗干扰能力,均满足实际分析要求。方法对腐胺的检测限为0.44μmol/L,线性区间为0.8-200μmol/L。  采用建立的方法对十种鱼类样品中腐胺的含量进行了测定,十种样品中腐胺的加标回收率在94.4%-106.3%之间,说明所建立的方法可以用于鱼类样品中腐胺含量的测定。不同类别的鱼类样品中,罐装鱼类食品的腐胺含量最高,鱼干类食品腐胺含量次之,鲜鱼食品中腐胺含量最低,这对于人们选购健康的鱼类食品具有重要的参考意义。  此外,本论文还研究了磁性微珠亲和筛选技术在乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选方面的应用。制备了磁性微珠固定化乙酰胆碱酯酶,并对花椒提取物中潜在的乙酰胆碱酯酶抑制剂进行了筛选。
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